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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 单抗纯化方法
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sxndliujing

金虫 (小有名气)

[交流] 单抗纯化方法

本人是生物制品公司的，现在单抗做到制备小鼠腹水，准备纯化，大家都是用什么方法纯化呢？因为我们是要生产的，所以成本不能太高。
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1楼 2012-08-22 14:44:22
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myfinalway

木虫 (正式写手)
★
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2012-08-23 05:59:13
用工业纯化柱
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2楼2012-08-22 19:37:47
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sxndliujing

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by myfinalway at 2012-08-22 19:37:47
用工业纯化柱

工业柱就是柱层析吗？那过柱子之后还要浓缩吧？
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3楼2012-08-23 08:23:15
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xj3661

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
sxndliujing: 金币+1, 谢谢！ 2012-08-23 09:49:52
以前在企业我们纯抗体步骤是：澄清，超滤，DEAE层析柱、亲和层析柱，这都是生产规模了(中试规模以上)，不知楼主能否用得上
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4楼2012-08-23 09:15:47
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sxndliujing

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xj3661 at 2012-08-23 09:15:47
以前在企业我们纯抗体步骤是：澄清，超滤，DEAE层析柱、亲和层析柱，这都是生产规模了(中试规模以上)，不知楼主能否用得上

谢谢！超滤是不是就是过0.22的膜？亲和层析柱是指protein A或protein G吗？DEAE层析柱和亲和层析柱只过一个行不行？
我的问题有点多
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6楼2012-08-23 09:58:03
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eurekayan

荣誉版主 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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7楼2012-08-23 10:14:31
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xj3661

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wizardfan: 金币+5, 谢谢参与，解释得很详细 2012-08-24 05:25:19
wizardfan: 回帖置顶 2012-08-24 05:25:26
sxndliujing: 金币+3, 很详细，谢谢！ 2012-08-24 13:02:24
在纯化过程前面步骤的超滤一般是指超滤膜包，不同截留量的，我们常用的是10KD的；亲和柱时是Protein A； 关于DEAE和亲和能不能只用一个的问题呢，我们过DEAE的目的主要是让它吸附细胞上清中酚红等杂质，所以纯化的效果不明显，而亲和的特异性很高，纯化的效果好！而且我们的亲和柱子都非常脆弱，直接上细胞上清估计就挂了！
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8楼2012-08-23 20:02:48
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xiehe_ai

金虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
sxndliujing: 金币+1, 谢谢！ 2012-08-25 13:06:42
引用回帖:
6楼: Originally posted by sxndliujing at 2012-08-23 09:58:03
谢谢！超滤是不是就是过0.22的膜？亲和层析柱是指protein A或protein G吗？DEAE层析柱和亲和层析柱只过一个行不行？
我的问题有点多...

0.22μm的是微滤，超滤一般是1nm~20nm。较少大于20nm的
抗体分子量一般在150KD左右，理论上小于这个数值的超滤膜都可，但由于膜孔径的不均一性，还是适当小点好。
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9楼2012-08-25 11:32:58
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biopharmedu

捐助贵宾 (小有名气)
参考GE 抗体纯化手册
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10楼2012-08-28 09:31:09
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简单回复
8531974865楼
2012-08-23 09:26   回复  
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