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sxndliujing

金虫 (小有名气)


[交流] 单抗纯化方法

本人是生物制品公司的,现在单抗做到制备小鼠腹水,准备纯化,大家都是用什么方法纯化呢?因为我们是要生产的,所以成本不能太高。
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xj3661

木虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wizardfan: 金币+5, 谢谢参与,解释得很详细 2012-08-24 05:25:19
wizardfan: 回帖置顶 2012-08-24 05:25:26
sxndliujing: 金币+3, 很详细,谢谢! 2012-08-24 13:02:24
在纯化过程前面步骤的超滤一般是指超滤膜包,不同截留量的,我们常用的是10KD的;亲和柱时是Protein A; 关于DEAE和亲和能不能只用一个的问题呢,我们过DEAE的目的主要是让它吸附细胞上清中酚红等杂质,所以纯化的效果不明显,而亲和的特异性很高,纯化的效果好!而且我们的亲和柱子都非常脆弱,直接上细胞上清估计就挂了!
8楼2012-08-23 20:02:48
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普通回帖

myfinalway

木虫 (正式写手)



wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2012-08-23 05:59:13
用工业纯化柱
2楼2012-08-22 19:37:47
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sxndliujing

金虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by myfinalway at 2012-08-22 19:37:47
用工业纯化柱

工业柱就是柱层析吗?那过柱子之后还要浓缩吧?
3楼2012-08-23 08:23:15
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xj3661

木虫 (正式写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
sxndliujing: 金币+1, 谢谢! 2012-08-23 09:49:52
以前在企业我们纯抗体步骤是:澄清,超滤,DEAE层析柱、亲和层析柱,这都是生产规模了(中试规模以上),不知楼主能否用得上
4楼2012-08-23 09:15:47
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sxndliujing

金虫 (小有名气)


引用回帖:
4楼: Originally posted by xj3661 at 2012-08-23 09:15:47
以前在企业我们纯抗体步骤是:澄清,超滤,DEAE层析柱、亲和层析柱,这都是生产规模了(中试规模以上),不知楼主能否用得上

谢谢!超滤是不是就是过0.22的膜?亲和层析柱是指protein A或protein G吗?DEAE层析柱和亲和层析柱只过一个行不行?
我的问题有点多
6楼2012-08-23 09:58:03
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eurekayan

荣誉版主 (知名作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
7楼2012-08-23 10:14:31
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xiehe_ai

金虫 (著名写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
sxndliujing: 金币+1, 谢谢! 2012-08-25 13:06:42
引用回帖:
6楼: Originally posted by sxndliujing at 2012-08-23 09:58:03
谢谢!超滤是不是就是过0.22的膜?亲和层析柱是指protein A或protein G吗?DEAE层析柱和亲和层析柱只过一个行不行?
我的问题有点多...

0.22μm的是微滤,超滤一般是1nm~20nm。较少大于20nm的
抗体分子量一般在150KD左右,理论上小于这个数值的超滤膜都可,但由于膜孔径的不均一性,还是适当小点好。
9楼2012-08-25 11:32:58
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biopharmedu

捐助贵宾 (小有名气)


参考GE 抗体纯化手册
10楼2012-08-28 09:31:09
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简单回复
8531974865楼
2012-08-23 09:26   回复  
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