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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教PCR高手，使用SYBR Green I法进行荧光定量PCR对于产物大小有什么要求？
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李44

新虫 (初入文坛)
我做的产物在100-150bp之间

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21楼2018-12-20 19:50:03
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

建议重新设计引物，而且楼主需要注意，如果后期的引物设计不合理，溶解曲线会出现双峰情况，溶解曲线就是为了区分样品是否有非特异性扩增和初始模板有无被污染的情况，我们实验室用BIOGHC -PCR检测了DNA,如果出现单一峰且峰值在Tm值位置出现，这就证明没有非特异性扩增，且初始模板没有被污染；如果出现多个峰，估计是有非特异性扩增了或者初始模板有被污染的情况
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22楼2019-02-18 10:35:32
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