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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC分析动物细胞培养基中的游离氨基酸，怎么做预处理
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新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC分析动物细胞培养基中的游离氨基酸，怎么做预处理

现在需要做动物细胞培养基以及培养液中游离氨基酸含量，我们的预处理方法是200ml样品+800ml无水乙醇，涡旋震荡30分钟，12000rpm20min，上清进样分析。可有资料显示是直接进样或高速离心后上清进样分析，这样的话我的考虑是培养基中的蛋白/糖等物质会不会堵塞柱子

请教：同仁们怎么做的预处理？

谢谢
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1楼 2012-08-20 10:30:47
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回帖置顶 ( 共有1个 )

vetszh1181

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
随时领金币: 回帖置顶 2012-08-22 08:55:24
引用回帖:
5楼: Originally posted by 随时领金币 at 2012-08-21 07:59:23
盐酸消化道是个不错的思路，可以考虑...

盐酸消化，测的是总氨基酸含量，包括蛋白质中的，要测游离氨基酸只能使用乙醇、甲醇、乙腈水等提取，使用乙腈水的效果较好，它能将蛋白质等杂质沉淀掉
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6楼2012-08-21 16:50:47
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普通回帖

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新虫 (初入文坛)
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2楼2012-08-20 13:42:49
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新虫 (初入文坛)
3楼2012-08-20 16:07:56
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tangxinyu

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
随时领金币: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-08-21 07:58:04
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助，欢迎常来分析版交流 ^ ^ 2012-08-21 08:24:02
可以用盐酸等消化24小时
就可以较好避免糖脂肪等堵塞色谱柱
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作余挖井
4楼2012-08-20 16:14:12
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新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by tangxinyu at 2012-08-20 16:14:12
可以用盐酸等消化24小时
就可以较好避免糖脂肪等堵塞色谱柱

盐酸消化道是个不错的思路，可以考虑
赞一下 回复此楼
5楼2012-08-21 07:59:23
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新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by vetszh1181 at 2012-08-21 16:50:47
盐酸消化，测的是总氨基酸含量，包括蛋白质中的，要测游离氨基酸只能使用乙醇、甲醇、乙腈水等提取，使用乙腈水的效果较好，它能将蛋白质等杂质沉淀掉...

那我还是用乙醇处理吧，毕竟乙醇毒性小点，谢谢
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7楼2012-08-22 08:56:28
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