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helloAnne

新虫 (初入文坛)

[求助] EMSA得不到阴性对照

有没有人做过EMSA啊,为什么我得不到阴性对照呢,试过的所有DNA都能"结合"上我的蛋白,请高手指点!!!
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helloAnne

新虫 (初入文坛)

顶一下,坐等高人~~~~
2楼2012-08-09 20:25:00
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lilirong2009

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-08-10 13:52:09
楼主我做凝胶阻滞实验的时候没有用放射性标记,就跑普通的琼脂糖凝胶电泳,不知道楼主是否标记DNA?阴性对照就是未加蛋白的DNA片段,应该都能跑出来的。所有的DNA都能结合你的蛋白,说明你的蛋白与DNA结合能力强,你有没有做不同蛋白浓度与DNA的结合呢,蛋白浓度低的时候会补结合的。
3楼2012-08-10 11:12:11
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lilirong2009

铜虫 (小有名气)

另外决定凝胶阻滞实验分辨率的是蛋白质-DNA分子的质量比,而不是蛋白质或DNA分子的绝对质量。
4楼2012-08-10 11:14:38
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