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tai3936

金虫 (小有名气)

[求助] 洗脱剂的选择

我过柱子前点板选展开剂时,跑出的点总是连成一条线,虽然颜色分明,确没有明显的点。用的展开剂是石油醚/乙酸乙酯,还有石油醚/二氯甲烷,前者9:1,后者1:2跑在Rf0.4左右。我应该怎么办?怎样确定我的柱子的洗脱剂?~
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pennae8699

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 3Q 2012-08-08 23:29:28
加几滴酸试试,看看成斑点不~看看拖尾现象能改变不~~如果这种状态跑柱子的话,怕是分离效果也不太好啊
2楼2012-08-08 21:30:53
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tai3936

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennae8699 at 2012-08-08 21:30:53
加几滴酸试试,看看成斑点不~看看拖尾现象能改变不~~如果这种状态跑柱子的话,怕是分离效果也不太好啊

你好,加了一滴甲酸,跑得很高,加酸加碱都没有多大改善。
3楼2012-08-09 00:36:15
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xdz1978

至尊木虫 (文坛精英)

持之以恒!

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
加点氯仿,比例调一下,这种实验要不断探索才行
一身正气,两袖清风,三餐温饱,四大皆空!
4楼2012-08-09 09:53:27
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pennae8699

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
tai3936: 金币+1, ★有帮助, 谢谢 2012-08-10 10:56:50
引用回帖:
3楼: Originally posted by tai3936 at 2012-08-09 00:36:15
你好,加了一滴甲酸,跑得很高,加酸加碱都没有多大改善。...

甲酸对展开剂的影响应该不会这么大吧~~你加两三滴试试,我觉得跑的高还是你展开剂极性大了吧~调整一下~甲酸可以改善分离度~
5楼2012-08-09 10:48:04
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cpulhy

铜虫 (正式写手)

试试石油醚丙酮呢。跑出来的板成点性不好的话,上柱子也没什么效果
6楼2012-08-10 11:19:16
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cpulhy

铜虫 (正式写手)

石油醚/二氯甲烷这个系统可以点板,但是不能跑柱子。相比石油醚,二氯甲烷太重了,会把样品很快带下来。达不到点板时的效果。
7楼2012-08-10 11:23:46
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tai3936

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by cpulhy at 2012-08-10 11:23:46
石油醚/二氯甲烷这个系统可以点板,但是不能跑柱子。相比石油醚,二氯甲烷太重了,会把样品很快带下来。达不到点板时的效果。

二氯甲烷和石油醚不是可以互溶吗?为什么谁先下来的问题呢?
8楼2012-08-10 15:25:48
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cpulhy

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by tai3936 at 2012-08-10 15:25:48
二氯甲烷和石油醚不是可以互溶吗?为什么谁先下来的问题呢?...

我也以为两者相溶,能用来跑柱子。我还纳闷为什么实验室从没有人用这两种溶剂跑柱子。我那次点板的时候,几个点分得很开,成点性也很好。结果跑柱子的时候,一换梯度,全都冲下来了,一点分离效果都没有。
9楼2012-08-14 10:13:12
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tai3936

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by cpulhy at 2012-08-14 10:13:12
我也以为两者相溶,能用来跑柱子。我还纳闷为什么实验室从没有人用这两种溶剂跑柱子。我那次点板的时候,几个点分得很开,成点性也很好。结果跑柱子的时候,一换梯度,全都冲下来了,一点分离效果都没有。...

会不会是你刚配的溶剂就往柱子上倒了?二者还未充分混合呢?(配溶剂时先倒的石油醚,后倒的二氯甲烷,然后还未混匀的上层的二氯甲烷就倒入柱子了)
10楼2012-08-16 16:54:19
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