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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 为什么PCR扩增出来使这个样子，各位高手帮忙支招吧！
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liugaoming

木虫 (正式写手)
特异性不明显，你可以试着提高一下退火温度，祝你好运
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天道酬勤
11楼2012-08-07 10:03:23
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liugaoming

木虫 (正式写手)
特异性不明显，你可以试着提高一下退火温度，祝你好运
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天道酬勤
12楼2012-08-07 10:07:44
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wangning__

木虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by sd3824289 at 2012-08-07 09:26:53
建议楼主做个温度梯度试试，我筛选条件的时候都是用这个方法，很好的！基本上做一次就知道最适退火温度了，一般情况下，如果两次PCR用到得酶不一样，也会导致在相同的退火温度下得到不一样的结果！模板浓度如果高， ...

恩，那我试试，多谢指点，没有金币了，送你朵小红花表示感谢！
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乌拉拉
13楼2012-08-09 11:12:03
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jl860822

金虫 (正式写手)
我感觉可能是模板降解了，我以前也遇到过这种情况，花了很长时间才解决
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wangning__
14楼2012-08-09 15:54:27
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wangning__

木虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
14楼: Originally posted by jl860822 at 2012-08-09 15:54:27
我感觉可能是模板降解了，我以前也遇到过这种情况，花了很长时间才解决

很有可能呢，我的样品放置很久了。是不是要重新提取呢？
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乌拉拉
15楼2012-08-10 11:01:44
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风铃永不孤单

银虫 (小有名气)
建议楼主降低循环次数，或者减少DNA模板的量，或者提高退火温度，我也出现过这种问题，就是降低了循环次数就ok了~~~
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16楼2015-11-22 11:05:58
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