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liugaoming

木虫 (正式写手)

特异性不明显,你可以试着提高一下退火温度,祝你好运
天道酬勤
11楼2012-08-07 10:03:23
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liugaoming

木虫 (正式写手)

特异性不明显,你可以试着提高一下退火温度,祝你好运
天道酬勤
12楼2012-08-07 10:07:44
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wangning__

木虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by sd3824289 at 2012-08-07 09:26:53
建议楼主做个温度梯度试试,我筛选条件的时候都是用这个方法,很好的!基本上做一次就知道最适退火温度了,一般情况下,如果两次PCR用到得酶不一样,也会导致在相同的退火温度下得到不一样的结果!模板浓度如果高, ...

恩,那我试试,多谢指点,没有金币了,送你朵小红花表示感谢!
乌拉拉
13楼2012-08-09 11:12:03
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jl860822

金虫 (正式写手)


我感觉可能是模板降解了,我以前也遇到过这种情况,花了很长时间才解决

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

14楼2012-08-09 15:54:27
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wangning__

木虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
14楼: Originally posted by jl860822 at 2012-08-09 15:54:27
我感觉可能是模板降解了,我以前也遇到过这种情况,花了很长时间才解决

很有可能呢,我的样品放置很久了。是不是要重新提取呢?
乌拉拉
15楼2012-08-10 11:01:44
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风铃永不孤单

银虫 (小有名气)

建议楼主降低循环次数,或者减少DNA模板的量,或者提高退火温度,我也出现过这种问题,就是降低了循环次数就ok了~~~
16楼2015-11-22 11:05:58
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