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龙啸0216铜虫 (初入文坛)
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[求助]
谁做过脱氢酶活性啊？
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取泥样10g放入锥形瓶内，用等量的生理盐水充分搅拌，4000r/min离心10min沉淀，弃去上清液，如此反复2次。称取沉淀的污泥1g加入40ml Tris缓冲液，在室温下置1h并经常搅拌，过滤后的滤液即为酶液（这是论文里看来的，然后就说按照相关文献中改良的TTC法测定。。。） 以下是我从那篇文献中看到的方法： 准确取定量的实验待用菌液，加入Tris缓冲液2ml，置于37℃恒温培养箱中,反应 2小时显色后，准确加入三氯甲烷溶液5ml,在常温下进行萃取。放置片刻，待溶液分层后,移至比色皿中。分光光度计在波长485nm下的吸光值。将1小时产生1ugTF的量定义为一个酶活力单位。 我的问题是：是直接对酶液进行萃取吗？ 是测试产生沉淀的吸光值吗？ 如何确定“1小时产生1ugTF的量定义为一个酶活力单位。” 新手不太懂，请大侠帮忙~ |
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