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清风散人

铁虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质sds-page电泳图分析

样品是未知蛋白(显然marker不合适),四张图中大片蓝色部位都是点的同一个样,可以说明那就是目的条带吗?还有,这些图都不理想,分别有什么问题?

这是四次电泳的图片,所有的样品都是从微生物发酵液中硫酸铵沉淀法提取的目的蛋白
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
silicare: 回帖置顶 2012-08-06 07:15:25
silicare: 金币+5, BioEPI+1, 应助指数+1, 这个很到位 2012-08-06 07:15:39
引用回帖:
9楼: Originally posted by 清风散人 at 2012-08-05 21:11:32
四个图中大片蓝色都说明这个问题?谢~...

是的,一个蛋白质上样量再大,它的边缘也是齐整的,要是不齐整,那就肯定是有多个迁移率近似的蛋白质,你的斑点我分析如下,我在疑似有蛋白质条带的地方都标上箭头。另外传上我跑的电泳图,有一个蛋白质量较大,但是边缘齐整,注意比较和你的电泳条带的差别(第一个泳道是纯酶,其余泳道是含有该酶的各种样品,你可以根据纯酶的位置来确定这些样品中该酶的条带)。





流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
13楼2012-08-06 00:59:42
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查看全部 25 个回答

清风散人

铁虫 (小有名气)

非常好的帖子,正在看,感谢!
2楼2012-08-01 20:05:25
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robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的目的蛋白是否是分子量很小?有点像样品被降解的感觉。操作过程中加蛋白酶抑制剂了吗?
3楼2012-08-01 20:57:09
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清风散人

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by robert-RBT at 2012-08-01 20:57:09
你的目的蛋白是否是分子量很小?有点像样品被降解的感觉。操作过程中加蛋白酶抑制剂了吗?

是的,小分子蛋白,比marker最小的还小,所以应该在最下面。但是一直不确定是哪条:比如图2中marker带正常,旁边那两片深蓝色位置还不一样;图4也不知道marker左边的深色带跟右边的较规则的淡带是不是同一组分
4楼2012-08-01 21:26:21
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