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yonghaoye

银虫 (小有名气)

[求助] 求高手解答小鼠鼻腔石蜡切片问题~~~~

本人刚刚开始接触小鼠鼻腔的石蜡切片,今天刚刚做到了切片之一步,用的是旋转式切片机,切片后组织破碎如下图,浸蜡用的度是新蜡,然后放了一点蜂蜡进去增加柔软度,如下图,我想问知道是那步出现什么问题了??
步骤:
            乙醇70%        放在4°C冰箱保存了一天
1.脱水 乙醇80%        1.00h   
             乙醇  90%   1.00h  
            乙醇I                95%过夜   
           无水乙醇I      1h  
           无水乙醇Ⅱ    1h
2.透明:二甲苯一无水乙醇 (体积比为1:1        )30min
             二甲苯I                                                    30min
            二甲苯Ⅱ                                                    1.00h
3浸蜡:石蜡-二甲苯(体积比为1:1        ) 60℃          1.00h
            石蜡         60℃                                            1.00h
            石蜡         60℃                                             1.00h

当时切片的图





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yonghaoye

银虫 (小有名气)

不知道是不是浸蜡时石蜡没进到鼻腔里面去,有什么方法可以解决啊???还是其他问题?请大家提供一下见解或研究小鼠鼻腔切片方面的资料!!!!
2楼2012-07-31 01:18:21
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dongxie1982

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yonghaoye: 金币+5, 有帮助, 谢谢你的建议!!! 2012-07-31 11:19:52
个人认为:1、脱水不够,2、二甲苯透明时间过久,都会使标本变脆,可以试试这样:70%乙醇        4h或过夜
          80%乙醇    3h   
              95% 乙醇I   2h  
              95%乙醇Ⅱ  2h   
         无水乙醇I      2h  
             无水乙醇Ⅱ   2h
透明:二甲苯Ⅰ15~20min
      二甲苯Ⅱ15min
切片前可以将蜡块放-20冰箱过夜或时间长些或放冷台再切会更好切
3楼2012-07-31 11:08:17
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