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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于石蜡切片的改进
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维叶萋萋

金虫 (小有名气)

小公主

[交流] 关于石蜡切片的改进 已有9人参与

这是我上一次的实验：樱桃花芽的石蜡切片，FAA抽气固定，做时先流水冲洗过夜，第二天，酒精梯度脱水（50%1h，70%2h，85%1.5h，95%%1h,100%1h,100%1h）,然后浸蜡，分别是50%过夜，75%蜡4h，87.5%蜡4h，93%蜡过夜，第三天包埋。可是做出来老是脆的一切就碎。
上次发了这个，很感谢大家给的意见，我认真参考后做了修改，说一下我的思路，就是照着大家提的建议，设计了五种不同方案，1组是只减少了二甲笨处理时间，2组是只减少了酒精处理时间，为两组是为了看看到底是哪个因素影响比较大。3、4组是酒精和二甲笨处理时间都有所减少但都不如前两组减少的程度大，5组与上次失败的安排时间差不多，是为了再次确认上次实验的失败不是偶然因素，也想为结果做个对照。以下是各方案：
组序号        50﹪酒精        70﹪酒精        85﹪酒精              95﹪酒精
1        1h        2h        1.5h                     1h
2        1h        2h        1.5h                     50min
3        1h        2h        1.5h                     1h
4        1h        2h        1.5h                     1h
5        1h        2h        1.5h                     50min
　        100﹪酒精100﹪酒精  3／4A＋1／4二甲笨  1／2A＋1／2二甲笨
1        1h        1h              1h                              40min
2        40min        30min              1h                              50min
3        1h        30min              1h                             1h
4        40min        30min              1h                              50min
5        40min        40min              1h                              1h
　        1／4A＋3／4二甲笨 二甲笨                二甲笨                  25﹪蜡
1        40min                       20min                     20min                          2.5h
2        50min                       40min                     40min                          2.5h
3        50min                       40min                      30min                           2h
4        40min                       30min                     20min                           3h
5        50min                       40min                     40min                           2h
　        50﹪蜡        75﹪蜡        87.5﹪蜡        全蜡
1        过夜        4h        4h        过夜
2        过夜        3h        3h        过夜
3        过夜        4h        4h        过夜
4        过夜        3h        3h        过夜
5        过夜        4h        4h        过夜
忙活了三天，今天下午检测我的结果，发现以上几组的芽都是脆的，有点沮丧啊都第三次了还失败。因为样品是好几天前采的所以FAA固定后好几天才拿出来做，难道就是因为这个吗？师姐以前做果梅花芽也都固定几天才做，做出来就很好，真是奇怪了。实验室里没有抽真空的设备，所以抽气用的是注射器，抑或是因为抽气不完全？实验室里没有蜂蜡，也是做完后今天才上来看的。
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三山半落青天外，二水中分白鹭洲。
1楼 2012-07-26 22:14:24
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维叶萋萋

金虫 (小有名气)

小公主
粘的时间还好好的，算了大家看看原表格吧[ Last edited by 维叶萋萋 on 2012-7-26 at 22:21 ]
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    • 2012-07-26 22:21:27, 16 K
三山半落青天外，二水中分白鹭洲。
2楼2012-07-26 22:19:41
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思续纷飞

银虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖！ 2012-07-28 21:08:06
是因为时间的原因还是因为花芽外面苞片太厚太硬的原因？你怎么判断是太脆的原因？
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3楼2012-07-26 22:58:50
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维叶萋萋

金虫 (小有名气)

小公主
引用回帖:
3楼: Originally posted by 思续纷飞 at 2012-07-26 22:58:50
是因为时间的原因还是因为花芽外面苞片太厚太硬的原因？你怎么判断是太脆的原因？

切的时间？
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三山半落青天外，二水中分白鹭洲。
4楼2012-07-28 21:01:23
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不要回头

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖！ 2012-09-03 13:18:21
二甲苯和酒精没必要那么多梯度，一个1/2酒精+1/2二甲苯，两个二甲苯就足够了，并且二甲苯时间估计你长了，脆除了高浓度酒精，二甲苯其实也非常容易使组织变脆，试试酒精加浓度的那个45Min，第一个二甲苯40mn ,第二个二甲苯就根据具体情况看，等到透明即可，但最好不要超过40Min，试试看，
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5楼2012-09-03 11:39:03
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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2012-09-05 06:15:44
你这个蜡也不用做那么多梯度，还那么长时间吧。我都用纯蜡3*1小时
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6楼2012-09-04 18:17:25
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感恩小羊

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 思续纷飞 at 2012-07-26 22:58:50
是因为时间的原因还是因为花芽外面苞片太厚太硬的原因？你怎么判断是太脆的原因？

如果是因为花芽外面的苞片（鳞片）太硬的话，该怎么解决呢？多谢了！
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7楼2012-11-01 19:49:59
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yellowwing

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wizardfan: 金币+3, 鼓励新虫发帖 2012-11-29 08:44:32
你怎么判断材料脆的呀
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8楼2012-11-28 20:03:35
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北城风雪

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
silicare: 金币+2, 谢谢参与 2012-11-29 08:17:22
二甲苯的时间太长了，一般所有的二甲苯的时间加起来不要超过一个半小时为好。
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有所为，无所谓
9楼2012-11-28 22:49:17
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
在纯蜡中浸蜡至少2天，期间每天换一次纯腊，然后再包埋。如果不经过纯腊，则有残留过多的二甲苯，导致切片时材料切碎。
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10楼2012-12-03 09:24:27
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