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guoxinkun1金虫 (初入文坛)
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[求助]
以1800的线性DNA做模板PCR怎么P不出来
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| 俺是以融合PCR出来的1800bp的线性片段做模板做PCR的，p了好几次就是p不出来，请问是怎么回事啊？用线性片段做模板理论上行不行啊，是不是非得联T载做成环状质粒啊？（看小木虫上有用Dpn1的，Dpn1是什么东西啊...）各位大侠，求助啊 |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
guoxinkun1: 金币+66, 谢啦 2012-07-29 07:31:22
感谢参与，应助指数 +1
guoxinkun1: 金币+66, 谢啦 2012-07-29 07:31:22
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1.先确定模板木有任务问题，建议还是测序+跑电泳一起。 2.我之前也用过一段大概5000bp的片段作为模板，是可行的，建议检查下引物，进行温度梯度了吗？如果不行，建议建议模板浓度，再P。 3.产物有杂带吗？多吗？如果杂带多，建议检查下引物，重新设计。 希望对你有帮助。 |
7楼2012-07-26 23:12:57
gelois
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2楼2012-07-26 09:17:02
wu_shiyong
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guoxinkun13楼2012-07-26 09:31:21
guoxinkun1
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4楼2012-07-26 17:06:16