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guoxinkun1金虫 (初入文坛)
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[求助]
以1800的线性DNA做模板PCR怎么P不出来
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| 俺是以融合PCR出来的1800bp的线性片段做模板做PCR的,p了好几次就是p不出来,请问是怎么回事啊?用线性片段做模板理论上行不行啊,是不是非得联T载做成环状质粒啊?(看小木虫上有用Dpn1的,Dpn1是什么东西啊...)各位大侠,求助啊 |
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【答案】应助回帖
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感谢参与,应助指数 +1
guoxinkun1: 金币+66, 谢啦 2012-07-29 07:31:22
感谢参与,应助指数 +1
guoxinkun1: 金币+66, 谢啦 2012-07-29 07:31:22
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1.先确定模板木有任务问题,建议还是测序+跑电泳一起。 2.我之前也用过一段大概5000bp的片段作为模板,是可行的,建议检查下引物,进行温度梯度了吗?如果不行,建议建议模板浓度,再P。 3.产物有杂带吗?多吗?如果杂带多,建议检查下引物,重新设计。 希望对你有帮助。 |
7楼2012-07-26 23:12:57
gelois
金虫 (正式写手)
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2楼2012-07-26 09:17:02
wu_shiyong
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3楼2012-07-26 09:31:21
guoxinkun1
金虫 (初入文坛)
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4楼2012-07-26 17:06:16










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