24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 813  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

肖颖2009

铁虫 (正式写手)

[交流] 关于小片段连载体的问题 已有6人参与

大家来谈谈“小片段连载体一般会遇到什么问题”~

本人现在做的一个小片段才261bp,做了一个多月了,仍然没有找到重组子,但是在这之后来做的一个603bp的片段就很顺利,一下子就找到了很多重组子,并且现在已经测序正确了,这个只花了两周的时间。操作方法、连的载体、感受态细胞都一样,唯一不同的是序列不一样,再就是前者的His标签融合在N端,后者融合在C端,是不是因为这个有影响啊?为什么呢?

希望大家积极讨论,为我指点迷津啊~!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xn712100

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
261确实不算短,调整一下连接体系试试
5楼2012-07-25 08:45:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

polepolar

银虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可能的原因是261bp的片断太小,胶回收时容易丢失,最好是回收完后鉴定一下浓度。
北京普尔普乐生物技术有限公司(www.polepolar.com)
2楼2012-07-24 12:33:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiongyaoling

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
目的片段你是用双酶切还是单酶切,检测酶切是否完全!
3楼2012-07-24 14:56:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihegang2000

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
261bp不短了,20bp我都连过。是PCR产物,酶切片段?连T载体还是其它?
4楼2012-07-24 14:59:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂求院校招收 +7 鹤鲸鸽 2026-03-28 7/350 2026-03-31 11:21 by oooqiao
[考研] 本科211总分289,08工学真心求调剂 +3 utopiaE 2026-03-30 3/150 2026-03-30 23:42 by ms629
[考研] 11408总分309,一志愿东南大学求调剂,不挑专业 +5 天赋带到THU 2026-03-29 6/300 2026-03-30 20:49 by dick_runner
[考研] 281求调剂 +5 亚克西good 2026-03-26 7/350 2026-03-30 20:42 by dophin1985
[考研] 311求调剂 +7 蓝月亮亮 2026-03-30 7/350 2026-03-30 19:24 by 无际的草原
[考研] 071010 323 分求调剂 +3 Baekzhy 2026-03-27 3/150 2026-03-30 14:24 by andresqi
[硕博家园] 求调剂 有机化学考研356分 +10 Nadiums 2026-03-25 11/550 2026-03-30 11:56 by yjolah
[考研] 348求调剂 +6 小懒虫不懒了 2026-03-28 6/300 2026-03-30 10:29 by Evan_Liu
[考研] 311求调剂 +10 lin0039 2026-03-26 10/500 2026-03-30 10:26 by herarysara
[考研] 070305高分子化学与物理 304分求调剂 +12 c297914 2026-03-28 12/600 2026-03-29 16:21 by Serene1974
[考研] 332求92调剂 +8 蕉蕉123 2026-03-28 8/400 2026-03-29 10:46 by 周梓丹
[考研] 本科双非材料,跨考一志愿华电085801电气,283求调剂,任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
[考研] 330分求调剂 +5 qzenlc 2026-03-29 5/250 2026-03-29 07:37 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +7 争取九点睡 2026-03-28 8/400 2026-03-28 21:07 by 争取九点睡
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +10 y7czhao 2026-03-26 10/500 2026-03-28 14:23 by 唐沐儿
[考研] 086502化学工程342求调剂 +6 阿姨复古不过 2026-03-27 6/300 2026-03-28 07:06 by wangy0907
[考研] 调剂推荐 +5 清酒714 2026-03-26 6/300 2026-03-27 11:12 by 不吃魚的貓
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
信息提示
请填处理意见