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独立寒秋木虫 (正式写手)
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[求助]
HPLC 求教！
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| 各位高手 我在做一个糖脂，糖脂极易溶于在二氯甲烷中，在甲醇中溶解度很小，用HPLC分析 用的是C18的反相柱，分析型， 流动相用的的乙腈 水（均含有0.1%的乙酸）梯度洗脱 具体如下啊：开始50%乙腈+50%水 30分钟后100%乙腈+0%水 30-40分钟100%乙腈 50分钟后再回到50%乙腈+50%水。由于我的样品很容易溶解在二氯甲烷中，开始用二氯甲烷进样10 -20Ul 结果发现跑的很难看，并且前几分钟就出现很难看 并且吸光度很高的鬼峰，（分析可能是二氯甲烷和乙腈水体系不互溶，导致鬼峰）后来用甲醇溶解，上样就没问题，但是问题是样品在甲醇中溶解度很小，峰很小，效果不好，(增大进样量到140ul，效果也不是很好，峰很小）我现在想让高手帮忙，帮我选一个溶剂，能与乙腈水体系互溶，同时对我的样品溶解度很好，请大家帮忙，不胜感激。定重谢！ |
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独立寒秋
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8楼2012-07-23 14:40:13
zhychen2008
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houqian387
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【答案】应助回帖
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首先试一下起始流动相比例（不加缓冲盐）对样品的溶解度好不好？ 如果还不能溶解再试一下纯乙腈；还不行就用甲醇：二氯甲烷=1:1溶解性肯定没问题了，而且和流动相互溶 但要关注：当用纯溶剂：强度大于流动相起始比例的溶剂时就有可能发生溶剂效应。原因就是柱头扩散，离子状态等因素 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
3楼2012-07-23 07:26:49
独立寒秋
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5楼2012-07-23 11:16:07
