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Kahn

金虫 (小有名气)

[求助] 药物抗氧化DPPH

抗氧化实验为什么要做DPPH的标准曲线,就是把DPPH不同浓度的测一遍吸光度,然后做一个线性回归方程,看过很多文献都做这个曲线。直接向一定量的DPPH中加入不同浓度抗氧化剂,然后做药物抗氧化的曲线,求出不同浓度对DPPH的影响,是不是这样就行了?
一般517nm的吸光度在什么范围内最好,要是能提供点数据举例,有追加悬赏。
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Kahn

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 豆哥 at 2012-07-22 12:25:13
首先我们要了解DPPH抗氧化实验的原理:
DPPH是一种比较稳定的脂性自由基,其N上有一个游离电子,其乙醇溶液呈紫色,在517nm处有最大的吸收峰。加入抗氧化剂以后,DPPH捕捉一个电子与游离电子配对,紫色褪去,变为无 ...

如果取一定的DPPH溶液,加入不同浓度的药物,这样测出的吸光度与不加药测出的吸光度一起做一条曲线,求出IC50值。不做这条标准曲线可以吗?
3楼2012-07-22 12:42:41
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豆哥

主管区长 (职业作家)

制粒能手

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Kahn: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-07-22 12:39:47
leecius: 金币+1, 谢谢参与! 2012-07-22 19:43:03
首先我们要了解DPPH抗氧化实验的原理:
DPPH是一种比较稳定的脂性自由基,其N上有一个游离电子,其乙醇溶液呈紫色,在517nm处有最大的吸收峰。加入抗氧化剂以后,DPPH捕捉一个电子与游离电子配对,紫色褪去,变为无色物质,在517nm处的吸收消失,其褪色程度与其接受的电子数成定量关系。依此原理用分光光度计检测DPPH自由基与试样液反应后吸光值的变化,可检定试样提供氢原子、清除自由基抗氧化的能力。
线性方程是游离的DPPH的浓度方程,因此,这个标准曲线在每次做实验的时候都要做的。只有有了这个曲线才能求出游离的DPPH的浓度。
另外吸光度应该落在标准曲线以内,这样的话需要做预试验。最好吸光度不要超过1.
边学边问,才有学问。
2楼2012-07-22 12:25:13
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豆哥

主管区长 (职业作家)

制粒能手

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
leecius: 金币+1, 谢谢参与! 2012-07-22 19:43:11
Kahn: 金币+3, 有帮助, 明白了,谢谢 2012-07-23 08:07:15
这就要看你的实验目的了
如果仅仅要验证目标物的抗氧化能力,可以不做
但是要做IC50,需要做标曲
边学边问,才有学问。
4楼2012-07-22 15:29:05
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xyz7819227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Kahn: 金币+4, 有帮助 2012-07-24 21:34:27
其实不做也是可以的,特别是你在比较几种抗氧化剂的效果的时候,直接测IC50值就行。只是做这条曲线会显得实验更严谨。
海纳百川,有容乃大
5楼2012-07-24 21:02:08
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