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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 光谱分析 » 【求助】紫外分光光度计测定，这样的情况如何确定最佳吸收波长呢？谢谢
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lijun31823

木虫 (小有名气)

[求助] 【求助】紫外分光光度计测定，这样的情况如何确定最佳吸收波长呢？谢谢

昨天重新测了，没有自动扫描的，手动测。没有最大吸收波长，只有最低的，而且数据波动很大。
波长        A
200        0.917
205        0.908
210        0.717
215        0.511
220        0.345
225        0.217
230        0.13
235        0.078
240        0.048
245        0.033
250        0.028
255        0.028
260        0.035
270        0.028
280        0.03
290        0.022
300        0.025
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1楼 2012-07-19 08:16:54
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lijun31823

木虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by wddmq at 2012-07-19 15:32:53
1.你还有其它可以作对照品的么？
2.最佳波长一般就是选最大吸收，但为了避免其它物质的干扰，也会选择其它波长。用不着用那么多不同的浓度进行不同波长的吸光度测定。首先你的确定你的检测浓度，然后在这个浓度下选 ...

我所用的I+G 没有标准品，我选择了一种纯度比较高的来做标准曲线。
这些测定出来的吸光度趋势都是下降的，不知道为什么？
查了很多文献，国标也有说明，是250nm，260nm，280nm，大概就是这些，可是我测出来的这些波长下却是这样的数据。
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11楼2012-07-19 16:00:04
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wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lijun31823: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-07-19 09:34:13
选择检测波长一般选择吸收曲线上斜率小的地方，如峰顶或峰谷，这样略微的仪器偏差不会造成太大的影响；
另外因为检测的吸收度要适中，如果样品溶液浓度很大又不想要稀释，可以选择吸收小一点的波长处（或者用薄一点的比色皿）；同理，如果浓度本身就很小就不能选择吸收很弱的波长。
在检测波长避免有别的物质的干扰，特别是紫外检测，即溶剂或是溶液中的其它成分在此波长下无吸收或是吸收较弱。
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1234
2楼2012-07-19 09:18:30
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wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
soundhorizo: 金币+3, 专家辛苦 ^^ 2012-07-19 10:56:09
像你给出的这组数据，200nm处及245之后都较为平坦，但前者估计其它物质干扰很大，后面的吸收又太弱。有点麻烦
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1234
3楼2012-07-19 09:28:13
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lijun31823

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wddmq at 2012-07-19 09:18:30
选择检测波长一般选择吸收曲线上斜率小的地方，如峰顶或峰谷，这样略微的仪器偏差不会造成太大的影响；
另外因为检测的吸收度要适中，如果样品溶液浓度很大又不想要稀释，可以选择吸收小一点的波长处（或者用薄一点 ...

吸光度不是说控制在0.2~0.8比较好吗，我测的数值怎么都那么小呢，溶液浓度需要怎么控制才好，我做的是I+G测定，参比是0.01mol/L HCL溶液。
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4楼2012-07-19 09:29:51
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