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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我的实时定量溶解曲线图，有问题想请教各位！
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wushuwei1104

银虫 (小有名气)

[交流] 我的实时定量溶解曲线图，有问题想请教各位！

这是我做的实时定量溶解曲线图，图中在目的基因扩增峰前面有个小小的凸起，请问这会影响实验结果吗？这样的图，发英文文章的话可以不可以？还有就是前面的小凸起是什么原因造成的？请各位大侠指点，谢谢！！




第二张扩增曲线中前面有个凹陷，这个是什么造成的？会不会影响实验结果？能不能发英文文章。谢谢！！！

溶解曲线，后面大峰为目的基因峰，前面小凸起。



溶解曲线，后面大峰为目的基因峰，前面小凹陷。
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1楼 2012-07-16 11:42:48
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wmjqy

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1949stone: 金币+2, 鼓励 2012-07-17 07:28:04
你这个可能引物设计有问题。碱基对过长，从这个图可以看出你的Tm值都快92了！！！！！引物严重过长，你这个引物用来跑普通PCR的吧~！???.实时荧光定量的引物和普通的引物是有区别的。建议找英韦创津或TAKARA设计或合成引物。
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5楼2012-07-16 23:28:01
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霹雳光

至尊木虫 (著名写手)
★
wushuwei1104(金币+1): 谢谢参与
不行吧，太简单了吧
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2楼2012-07-16 11:51:52
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tupac225

金虫 (正式写手)
★ ★
wushuwei1104(金币+1): 谢谢参与
1949stone: 金币+1, 有时候就是不会很完美啊啊 2012-07-17 07:28:31
发英文的肯定不行了,图不是太完美.
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3楼2012-07-16 12:41:18
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shenye.judy

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-16 13:56:09
溶解曲线是不大好看，建议做完qPCR后，可以跑个胶，或者加点染料再跑，看看有没有其他条带的影响。

如果结果还是不好，就建议重新设计引物。

但是，如果你溶解曲线都要提供的话，你应该还要确定你的扩增效率才行啊，这个对qPCR也是很重要的，你可以考虑下。
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4楼2012-07-16 13:25:08
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