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喵汪

银虫 (小有名气)


[交流] 抗体对基底的非特异吸附严重,怎样解决?

在做增强化学发光,买来的一种抗体对基底存在很严重的吸附,用HRP标记的二抗处理后整个基底都在亮,显现不出抗原的位置。我觉得不是实验操作的问题,用的清洗剂是含吐温20的,封闭剂是含BSA的,做了另一种抗原的检测现象是正常的。
所以问题就出在这个抗体身上了,但是抗体为什么出现这种问题呢,是不是出厂时没有纯化好?我该怎样解决呢?
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喵汪

银虫 (小有名气)


问题还没解决,求高人指点!
2楼2013-04-02 20:37:39
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robustli

银虫 (小有名气)



喵汪(金币+1): 谢谢参与
you can try 1% milk to block.
3楼2013-04-02 21:04:20
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烟大考研

金虫 (正式写手)



喵汪(金币+1): 谢谢参与
在不涉及机密情况下,建议可以把抗原的种源性和其他特性大概的叙述一下,一抗和二抗的种源性也说清楚,另外做的那个对照试验是怎么做的也详述一下,这样更容易让大家帮助分析一下。原则上讲脱脂牛奶封闭和BSA封闭的区别不会很大。
4楼2013-04-02 22:51:44
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