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小米小丑

新虫 (初入文坛)

[求助] 我想测土壤磷酸酶。不过里面有个试剂叫:氯代二溴对苯醌亚胺、太贵了。怎么办?

老师又不想花钱买

这个实验还能做下去吗?

各位大侠都是怎么测得?
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pj198811

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
找《土壤农化分析》看看,这个试剂不需要的
3楼2012-07-09 09:22:17
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查看全部 5 个回答

yhz2009

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也测过这种酶啊,但是没有用到你说的这种试剂!不知道你是参考的哪一本资料,我参考的是吴金水老师主编的《土壤微生物生物量测定方法及其应用》,2006年版,由北京气象出版社出版,你看一下有没有帮助
2楼2012-07-09 07:56:29
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pj198811

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

以下是我本科毕业论文做过的
·····························································
碱性磷酸酶采用磷酸苯二钠比色法:
1.标准曲线的绘制:取1、3、5、7、9、11、13ml酚工作液,置于50ml容量瓶中,分别加入20ml蒸馏水,再加0.25ml PH9.8氯化铵-氢氧化铵缓冲液,0.5ml 4-氨基安替比林液,0.5ml铁氰化钾,每次加入需充分摇匀,最后定容至50ml ,15min内在510nm处比色.以含酚的毫克数为纵坐标,以OD值为横坐标绘制标准曲线。
2.磷酸酶活性测定:称取5g土样风干,于50ml三角瓶中,加5滴甲苯后,加20ml 0.5% 磷酸苯二钠,充分震荡后于37℃恒温培养2h,取培养后的滤液3ml,按绘制标准曲线的方法显色,比色测定。
3.结果计算
磷酸酶活性=a×稀释倍数(200/3)×0.32×2.29/h
a—3ml滤液酚的毫克数
0.32—以磷为单位表示结果的系数(在磷酸苯二钠中,1个重量单位的酚,相当于0.32重量单位的磷)
2.29—将P换算为P2O5的系数
单位:mg•P2O5•g-1•h-1
4楼2012-07-09 09:24:33
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淡色系

新虫 (初入文坛)

这种试剂是比较贵
但是测得步骤比较少 比较快
你可以试试上面推荐的传统的方法
虽然慢一点但是花钱少
5楼2012-07-10 19:04:22
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