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我想测土壤磷酸酶。不过里面有个试剂叫：氯代二溴对苯醌亚胺、太贵了。怎么办？
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老师又不想花钱买 这个实验还能做下去吗？ 各位大侠都是怎么测得？ |
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yhz2009
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【答案】应助回帖
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以下是我本科毕业论文做过的 ····························································· 碱性磷酸酶采用磷酸苯二钠比色法： 1.标准曲线的绘制：取1、3、5、7、9、11、13ml酚工作液，置于50ml容量瓶中，分别加入20ml蒸馏水，再加0.25ml PH9.8氯化铵-氢氧化铵缓冲液，0.5ml 4-氨基安替比林液，0.5ml铁氰化钾，每次加入需充分摇匀，最后定容至50ml ，15min内在510nm处比色.以含酚的毫克数为纵坐标，以OD值为横坐标绘制标准曲线。 2.磷酸酶活性测定：称取5g土样风干，于50ml三角瓶中，加5滴甲苯后，加20ml 0.5％ 磷酸苯二钠，充分震荡后于37℃恒温培养2h，取培养后的滤液3ml，按绘制标准曲线的方法显色，比色测定。 3.结果计算 磷酸酶活性=a×稀释倍数（200/3）×0.32×2.29/h a—3ml滤液酚的毫克数 0.32—以磷为单位表示结果的系数（在磷酸苯二钠中，1个重量单位的酚，相当于0.32重量单位的磷） 2.29—将P换算为P2O5的系数 单位：mg•P2O5•g-1•h-1 |
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