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wanzhen

银虫 (小有名气)

[求助] 单向混合淋巴细胞培养

各位老师,各位同道,小弟这段时间在做单向混合淋巴细胞培养(大鼠脾脏来源的淋巴细胞作反应细胞,以25 ug/ml 丝裂霉素C处理的小鼠脾脏来源的淋巴细胞作刺激细胞),另外做了大鼠淋巴细胞与Con A 4ug/ml混合培养,和单独的大鼠淋巴细胞培养,培养液是1640培养基+10%FBS+青链双抗,培养3 d后图片见下:
图1 淋巴细胞培养72小时后照片
图2 淋巴细胞经ConA(4ug/ml)处理后48小时
图3 淋巴细胞经ConA(4ug/ml)处理后72小时
图4 大鼠淋巴细胞与小鼠淋巴细胞共培养后72小时(培养液含sFasL诱导活化细胞凋亡)

我想请教的是图2-4中淋巴细胞状态怎么样,增殖了吗?里面黑乎乎的一团感觉是死亡细胞,那是怎么回事,如果是的话,那淋巴细胞经ConA刺激应该大量增殖、活化,怎么反而大量死亡?还望给位做过混合淋巴细胞培养的老师、同道答疑解惑,小弟先行感谢了。

图1 淋巴细胞培养72小时后照片



大鼠淋巴细胞与小鼠淋巴细胞共培养后72小时(培养液含sFasL诱导活化细胞凋亡)



图2 淋巴细胞经ConA(4ug/ml)处理后72小时



淋巴细胞经ConA(4ug/ml)处理后48小时
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苦心人天不负
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求学者-007

新虫 (初入文坛)

你最后收集用计数板计数了吗
2楼2016-12-21 16:09:17
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