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xiaoyan1028

木虫 (正式写手)

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[求助] 含蛋白质的样品，进C18柱，会对柱子产生什么影响呢？

如题，最近在做大豆中活性成分提取。蛋白质含量很高。样品过0.45微米的滤膜一个小时以后，会在瓶底出现沉淀，怀疑是蛋白质。沉淀后，经过二次过滤的话会好些。想问下大家，我第一次过滤完后直接进样，会不会对柱子产生影响？主要是什么影响呢？我流动相为乙腈，水（pH=3）。
看论坛上说，蛋白会堵塞柱子，我这个已经过了0.45微米的滤膜了，会不会沉淀在柱子上呢？看文献的话，大多数人都是没有经过脱蛋白处理的呢。
谢谢大家

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1楼 2012-07-04 09:33:19

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liu2011

金虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

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引用回帖:

5楼: Originally posted by xiaoyan1028 at 2012-07-04 12:24:40
看文献，前处理一般都是差不多的。提取，离心或过滤，旋蒸，复溶，过滤膜，进样。就是不知道别人做的时候会不会有沉淀。刚过完滤膜的时候是很澄清的呀，进完样，放置一段时间，就有沉淀了。
用大孔径的色谱柱，不 ...

离心也分好多种，普通的离心，快速离心和超速离心，效果差别很大，而且这个问题我以前遇见过，进几个样品柱压就高得一塌糊涂了，建议还是过小孔径膜，即使你过膜后再去离心还是有沉淀，