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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » HPLC峰形
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huahua8572

木虫 (初入文坛)

[求助] HPLC峰形

最近在做一化合物的HPLC，出现了以下的现象，百思不得其解，望能有高手指点。
（1）化合物为盐酸盐，当流动相为水-0.1%甲酸-乙腈系统时，HPLC图谱中出现两个峰（图1），且两峰比例在刚配完样进样分析时约为15:85，之后一直稳定在25:75。为什么会出现两个色谱峰呢？

（2）同一化合物，当流动相为醋酸铵溶液（0.1%三乙胺，pH=6.2）-乙腈时，HPLC图谱如下（图2），出现一个鼓起来的峰，对应空白溶剂中没有该峰，这个鼓包该如何解释呢？可能是由什么引起的呢？

希望大家帮忙对以上两个现象进行分析讨论指点，万分感谢啊！！！

图2



图1
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1楼 2012-06-25 22:20:55
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woshimofeier

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果检测波长比较小基线容易不平，再就是溶剂效应如果溶剂有机相比例太高强度大于流动相强度也有可能出现这种情况
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11楼2013-03-03 17:36:56
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ltxin2009

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
痴夷子皮: 金币+1, 谢谢交流，欢迎常来哦。 2012-06-27 08:20:04
1、试试用流动相溶解样品；
2、试试不同的波长；
3、试剂有时会影响。
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2楼2012-06-26 08:44:00
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snowrabbit

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
痴夷子皮: 金币+1, 谢谢交流，欢迎常来哦。 2012-06-27 08:20:11
样品纯吗？柱子平衡好了吗？该样品分析了几次？确定该数据重复吗？
图一中前面峰会不会是溶剂峰，如果不是溶剂峰，那保留时间也太短了。图二中包括鼓起来的峰，共三个峰。个人觉得色谱条件没稳定好。
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3楼2012-06-26 08:47:52
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xiaoxiazizx

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
痴夷子皮: 金币+1, 谢谢交流，欢迎常来哦。 2012-06-27 08:20:16
其中肯定有溶剂峰吧，你做的化合物不知道纯不纯，有可能有杂质吧
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刻意去找的东西，往往是找不到的。天下万物的来和去，都有他的时间。
4楼2012-06-26 08:56:49
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