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我想做苜蓿抗热基因这一方面，但是现在思绪很乱，不知道从何入手，望高手指点
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 很热心的虫虫 2012-06-26 16:41:36
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小丹木木: 金币+3, 很热心的虫虫 2012-06-26 16:41:36
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你师兄消减杂交得到的cDNA就是苜蓿分别在高温和常温两种条件下差异表达的cDNA了吧？如果是这样的话接下来应该就如3L、4L所说那样做了，值得注意的是拿到感兴趣的cDNA片段序列后既可以用race拉基因全长，也可以根据EST信息拼基因全长，不过通常前者更可靠。 得到几个你认为可能的候选基因后可以先做做southern和real time PCR，验证该基因到底是不是在高温时特异表达及表达量有何变化等； 接下来就是转基因了，能转苜蓿最好，不能的话就只好转模式植物，转后同样需要用southern或real time PCR等手段验证基因的表达，若是表达的话再进行表型验证（就是看它到底是不是比一般的更耐热）。 想做得深点还可以把相应的蛋白质给找出来神马的…… ps：我没做过该实验，以上内容仅供参考。 |
7楼2012-06-25 22:58:19
8楼2012-06-26 15:09:03
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