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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物医学基础 » 肾脏切片总是破裂。什么原因呢
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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人

[求助] 肾脏切片总是破裂。什么原因呢

为什么我的小鼠肾脏切片在切片、捞片时都挺好 挺完整，但是当片子上的水干掉时，切片就开始产生裂缝，很多很小的缝。同时做的其它组织切片很正常，求高手指点。
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1楼 2012-06-22 10:58:25
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zoujie

铁杆木虫 (职业作家)
★
markar: 金币+1, 感谢回帖交流，欢迎常来生物材料版！ 2012-06-22 16:18:12
是不是干燥过程需要不对啊，没有做过这个，对肾组织不甚了解！！
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2楼2012-06-22 15:40:48
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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人
引用回帖:
2楼: Originally posted by zoujie at 2012-06-22 15:40:48
是不是干燥过程需要不对啊，没有做过这个，对肾组织不甚了解！！

我就放置室温条件下，想等水干掉再放烘箱。水干掉就细碎细碎的。
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3楼2012-06-22 18:31:46
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zoujie

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-06-22 22:12:22
你应该用梯度乙醇脱水吧
先切片，再将切片梯度脱水
或者你可以直接采用冰冻切片
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4楼2012-06-22 21:48:45
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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人
引用回帖:
4楼: Originally posted by zoujie at 2012-06-22 21:48:45
你应该用梯度乙醇脱水吧
先切片，再将切片梯度脱水
或者你可以直接采用冰冻切片

我是用乙醇梯度脱水，再浸蜡，然后包埋，切片，不得等到把玻片上的水干掉再用二进行脱蜡，复水。可就在玻片上的水干掉时，它就开始裂了。切片上还是石蜡，是先脱蜡吧，不是脱水。
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5楼2012-06-23 11:05:37
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你从哪里来

木虫 (小有名气)

大女人！
★
红舟流星: 金币+1, 欢迎来到生物功能材料板块应助交流 2012-08-29 10:45:29
这个原因可能有几个：
  1肾组织脱水太脆，容易在干后皱缩；
  2切片太薄，肾组织不适合切4μm以下的，否则肾小球容易丢失，最后看上去全是洞洞和间隙；
  3载玻片没有处理好（太干或者粘附性不好），使肾组织贴服性不好，容易皱缩；
  4如果肾脏组织是模型之后的，肾小管等本身就扩大，肾小球硬化、萎缩或者代偿性扩大，镜下也可看到类似裂开的样子；
  5看切到肾脏的那个部位，纵切，横切？皮质还是髓质？
建议，先脱蜡HE染色，看看组织是否齐全，再改进。
希望对你有帮助。
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6楼2012-08-29 09:59:14
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liubin

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
q317476148: 金币+1 2012-08-30 17:33:31
器官本来就容易粉。
检查是否该更换刀片。
载玻片上胶是不是没有涂均匀。
如果不是撕裂状的缝隙，就是蜡没有浸够。
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7楼2012-08-30 16:40:02
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