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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人

[求助] 肾脏切片总是破裂。什么原因呢

为什么我的小鼠肾脏切片在切片、捞片时都挺好 挺完整,但是当片子上的水干掉时,切片就开始产生裂缝,很多很小的缝。同时做的其它组织切片很正常,求高手指点。
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zoujie

铁杆木虫 (职业作家)


markar: 金币+1, 感谢回帖交流,欢迎常来生物材料版! 2012-06-22 16:18:12
是不是干燥过程需要不对啊,没有做过这个,对肾组织不甚了解!!
2楼2012-06-22 15:40:48
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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人

引用回帖:
2楼: Originally posted by zoujie at 2012-06-22 15:40:48
是不是干燥过程需要不对啊,没有做过这个,对肾组织不甚了解!!

我就放置室温条件下,想等水干掉再放烘箱。水干掉就细碎细碎的。
3楼2012-06-22 18:31:46
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zoujie

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-06-22 22:12:22
你应该用梯度乙醇脱水吧
先切片,再将切片梯度脱水
或者你可以直接采用冰冻切片
4楼2012-06-22 21:48:45
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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人

引用回帖:
4楼: Originally posted by zoujie at 2012-06-22 21:48:45
你应该用梯度乙醇脱水吧
先切片,再将切片梯度脱水
或者你可以直接采用冰冻切片

我是用乙醇梯度脱水,再浸蜡,然后包埋,切片,不得等到把玻片上的水干掉再用二进行脱蜡,复水。可就在玻片上的水干掉时,它就开始裂了。切片上还是石蜡,是先脱蜡吧,不是脱水。
5楼2012-06-23 11:05:37
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你从哪里来

木虫 (小有名气)

大女人!



红舟流星: 金币+1, 欢迎来到生物功能材料板块应助交流 2012-08-29 10:45:29
这个原因可能有几个:
  1肾组织脱水太脆,容易在干后皱缩;
  2切片太薄,肾组织不适合切4μm以下的,否则肾小球容易丢失,最后看上去全是洞洞和间隙;
  3载玻片没有处理好(太干或者粘附性不好),使肾组织贴服性不好,容易皱缩;
  4如果肾脏组织是模型之后的,肾小管等本身就扩大,肾小球硬化、萎缩或者代偿性扩大,镜下也可看到类似裂开的样子;
  5看切到肾脏的那个部位,纵切,横切?皮质还是髓质?
建议,先脱蜡HE染色,看看组织是否齐全,再改进。
希望对你有帮助。
6楼2012-08-29 09:59:14
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liubin

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖


q317476148: 金币+1 2012-08-30 17:33:31
器官本来就容易粉。
检查是否该更换刀片。
载玻片上胶是不是没有涂均匀。
如果不是撕裂状的缝隙,就是蜡没有浸够。
7楼2012-08-30 16:40:02
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