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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 关于原花青素在液相色谱中的检测
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liqili1986

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于原花青素在液相色谱中的检测 已有2人参与

我最近在做原花青素的树脂纯化，用了三个浓度梯度洗脱，纯化后的物质，30%的洗脱物跑液相效果很好，有三个明显的峰，杂峰不多。而50%和70%的洗脱物跑液相就跑不出来，但是我用原花青素的盐酸检测法又能检测出里面是含有大量的原花青素的。这是为什么了？明明是原花青素，但是这两个浓度液相为什么扫不出了。
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1楼 2012-06-19 21:59:18
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liqili1986

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-06-20 08:47:52
看不太懂，不知是否有理解错。
首先不同浓度的洗脱液，其洗脱能力不同，也就是说，分离效果会不同。30%、50%、70%分离效果不同，如果理解为指的是有机相比例，如乙腈，后两种的洗脱能力比前者强，造成用后两者跑的 ...

哦，可能是我没表达清。我说的洗脱是柱层析洗脱，就是洗脱后得到30%，50%和70%的洗脱物。然后把这三个浓度的洗脱物去跑液相。液相的条件是一样的，流动相也是一样的。30%的跑液相的效果很好，50%和70%就跑不出峰来。但是我用常规方法检测，这三个浓度的洗脱物原花青素含量都挺高。我就是想问下，后两个浓度的洗脱物跑不出峰是什么原因了？是液相仪器的原因，还是跟原花青素的高聚或者低聚的情况有关？
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3楼2012-06-20 11:33:20
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看不太懂，不知是否有理解错。
首先不同浓度的洗脱液，其洗脱能力不同，也就是说，分离效果会不同。30%、50%、70%分离效果不同，如果理解为指的是有机相比例，如乙腈，后两种的洗脱能力比前者强，造成用后两者跑的时候，物质不保留，故分离效果不好。
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守候在风中的宁静。
2楼2012-06-20 08:47:52
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主
引用回帖:
3楼: Originally posted by liqili1986 at 2012-06-20 11:33:20
哦，可能是我没表达清。我说的洗脱是柱层析洗脱，就是洗脱后得到30%，50%和70%的洗脱物。然后把这三个浓度的洗脱物去跑液相。液相的条件是一样的，流动相也是一样的。30%的跑液相的效果很好，50%和70%就跑不出峰来 ...

哦，应该与液相系统无关，原因是后者可能性更大。
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守候在风中的宁静。
4楼2012-06-20 11:40:24
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午后绿茶

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你做原花青素啊，我以前做过。我师姐（董瑞霞）也做过，我给你个她论文：茶籽壳原花青素的鉴定与分析。或者你在你们学校文献数据网站上搜下她的毕业论文：茶籽壳原花青素的提取、分离研究。里面有个梯度洗脱，看可适合你的样品。你现在还做原花青素吗？我公司有个样帮我测下（有报酬的，呵呵）。
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5楼2012-07-04 18:55:57
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