24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1685  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

小雨莎莎

木虫 (正式写手)

[交流] 请教做VEGF促进细胞增殖的实验的相关事情 已有4人参与

最近一直都在用B16摸索VEGF促进增殖的浓度和药物抑制的浓度的实验,但是的出来的结果总是不好。
   我是用96孔板接种,每空接种约2500个细胞。然后培养约16-24h后用无血清培养基处理24h,然后加VEGF(用无血清DMEM培养基配制,每次都是现用现配),设置的浓度有200ng/ml,100ng/ml和50ng/ml,按照文献的说法是10ng/ml处理48h都能够有反应的,但是我用VEGF处理72h,中间不换液,然后用MTT检测,但是结果总是很不好,用无血清培养基处理的细胞作为对照,VEGF处理的有时候甚至比无血清的对照还要低,根本就看不出有什么变化。
   而且还有一个问题就是每次接种完,在换无血清培养基处理24h后细胞数量看起来还是比较正常的,但是经过72h培养后就明显看出同一个处理不同孔细胞的密度不一样,照理来说我接种的时候都是先配好适当的浓度而且反复混匀后才接种的,是不是这样也会影响检测结果?但是VEGF处理的不论是哪个处理都没有明显差别~哪位虫友能指点一下?谢谢!

[ Last edited by 小雨莎莎 on 2012-6-19 at 20:51 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小雨莎莎

木虫 (正式写手)

其实我也不了解,不过我们用的是VEGF-A
14楼2014-09-15 11:03:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

小雨莎莎

木虫 (正式写手)

哪位虫友做过类似实验啊?给个建议呗~
2楼2012-06-20 09:54:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laokei

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你试一下细胞和药物一起加呢,减少一步操作,细胞和药物都用无血清的。先将药物稀释好,加100ul,再加100ul你要种的细胞。换液过程中可能有细胞损失!
还有,你换换其它的显色的试一试,不用MTT。像progma的MTS或者CCK-8

[ Last edited by laokei on 2012-6-20 at 16:09 ]
3楼2012-06-20 15:35:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小雨莎莎

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by laokei at 2012-06-20 15:35:19
你试一下细胞和药物一起加呢,减少一步操作,细胞和药物都用无血清的。先将药物稀释好,加100ul,再加100ul你要种的细胞。换液过程中可能有细胞损失!
还有,你换换其它的显色的试一试,不用MTT。像progma的MTS或者 ...

但是如果都用无血清的话细胞会不会无法贴壁啊?
4楼2012-06-20 22:11:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085701环境工程,267求调剂 +9 minht 2026-03-26 9/450 2026-03-27 15:29 by licg0208
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-25 7/350 2026-03-27 14:47 by 狂炫麦当当
[考研] 277跪求调剂 +4 1915668 2026-03-27 5/250 2026-03-27 14:18 by 杨光于青云
[考研] 0703化学求调剂,各位老师看看我!!! +4 祁祺祺 2026-03-25 4/200 2026-03-27 13:55 by stillstella
[考研] 329求调剂 +4 星野? 2026-03-26 4/200 2026-03-27 12:00 by 不吃魚的貓
[考研] 考研292求调剂 +3 YIXIAO789 2026-03-26 3/150 2026-03-27 10:51 by guoweigw
[考研] 324求调剂 +8 hanamiko 2026-03-26 10/500 2026-03-27 08:06 by hypershenger
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +4 JKSOIID 2026-03-26 4/200 2026-03-26 15:58 by 不吃魚的貓
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 8/400 2026-03-25 20:34 by 热情沙漠
[考研] 机械学硕总分317求调剂!!!! +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 一志愿国科过程所081700,274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪!?!
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 一志愿东华大学化学070300,求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
信息提示
请填处理意见