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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 外标一点法具体操作要求
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zuihuaying

银虫 (小有名气)

[求助] 外标一点法具体操作要求

进样体积不同时怎么计算供试品中的含量,这样子计算供试品中的含量准确吗？外标一点法不是要求操作一致的么？，进样量不同对计算结果有影响吗，外标一点法的具体要求是什么？本人是跨专业，在这里先谢谢各位高手
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1楼 2012-06-17 23:46:20
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回帖置顶 ( 共有1个 )

zuihuaying

银虫 (小有名气)
zuihuaying: 回帖置顶 2012-06-20 22:10:47
非常感谢谢你们的回答，还想在问一个问题，就是你们在做高效含测时，用外表一点法计算供试品含量时，做标准曲线的目的是确保你的供试品的峰面积在线性范围内吗？计算供试品含量时还是使用对照品和供试品峰面积之比等于二者浓度之比来计算么？高效液相含测时计算供试品含量的具体方法？在此，先谢谢各位了哈
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5楼2012-06-20 19:05:31
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zuihuaying

银虫 (小有名气)
恩恩，谢谢了哈，希望以后还能向你学习，我是跨专业的，刚开始用高效，研二就分课题了，先练手，谢谢了哈
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8楼2012-06-20 23:26:19
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普通回帖

zuihuaying

银虫 (小有名气)
怎么没人回答呀，是不是问得太简单啦，高手们都看不上呀
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2楼2012-06-18 23:24:46
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chen1989312

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-06-20 08:56:18
手动进样的进样器上有一个定量环，一般为20ul，
进样量大于20ul时，定量环会控制只进20ul进入柱子，此时对计算结果影响可忽略；
进样量小于20ul时，供试品与对照品的进样量就要求一致，否则不可计算。
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3楼2012-06-19 19:44:08
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陈树美

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢！ 2012-06-20 16:15:01
同楼上，外标一点法的标准品与供试品的进样量要保持一致，等到出峰后润洗进样针再打入供试品，在标准品相对应的保留时间段找就可以对比两者的差别了
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我相信青春没有地平线
4楼2012-06-20 14:25:40
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zuihuaying

银虫 (小有名气)
非常感谢谢你们的回答，还想在问一个问题，就是你们在做高效含测时，用外表一点法计算供试品含量时，做标准曲线的目的是确保你的供试品的峰面积在线性范围内吗？计算供试品含量时还是使用对照品和供试品峰面积之比等于二者浓度之比来计算么？高效液相含测时计算供试品含量的具体方法？在此，先谢谢各位了哈
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6楼2012-06-20 22:10:32
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鱼爱哈根达斯

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 多谢指教！ 2012-06-21 00:59:52
引用回帖:
6楼: Originally posted by zuihuaying at 2012-06-20 22:10:32
非常感谢谢你们的回答，还想在问一个问题，就是你们在做高效含测时，用外表一点法计算供试品含量时，做标准曲线的目的是确保你的供试品的峰面积在线性范围内吗？计算供试品含量时还是使用对照品和供试品峰面积之比等 ...

在高效液相分析方法的建立时，有检测限、定量限、线性、精密度、回收率等对方法进行验证。其中，检测限和定量限分别按照3倍和10倍信噪比来确定，一般而言，线性的最低点不得低于定量限，线性范围也是根据所测样品的浓度来确定的，一般而言，样品的浓度应该是线性的中间范围。其实，如果，样品浓度在线性之外，通过外推也是可以获得的，只是这样就缺乏了精准性。再者，具体的计算方法觉得你可以参照一下药典附录的规定，这样会更清晰一些。希望可以帮助到你
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脚踏实地
7楼2012-06-20 23:07:24
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ymy0814

金虫 (正式写手)
★
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-06-28 19:32:14
用液相测定含量时，一般保持进样体积一致，这样误差较小。不同体积的定量环可以很好的保证你的进样体积，但要注意进样时进样器中的待进样品（对照品）体积为定量环体积的三倍以上。进样顺序是先进对照品，清洗进样阀后进样品。
外标一点法和标准曲线法是我们实验设计和处理数据中常用的方法，标准曲线法主要是确定线性范围，液相一般要求4个九；也可将样品配置成标准曲线中的中间浓度，根据曲线方程计算具体浓度。外标一点法相对标准曲线法要简单得多，至少在时间上节约很多时间，但是要尽可能的保持对照品峰面积和样品的很接近，这样得到的结果准确。具体方法的选择请看下文献（一点法与工作曲线法两种外标法选择依据的探讨）
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9楼2012-06-25 14:01:32
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zuihuaying

银虫 (小有名气)
好滴，太感谢你了，还想问一下，用高效液相测定中药中有效成分含量时的，怎样进行实验设计，高效液相测定含量时用外标一点法计算含量和紫外分光光度计测定大类成分(总黄酮)含量的标准曲线法计算总黄酮含量是二者的计算方法有什么差别，二者的误差有何不同及具体适用情况，先谢谢啦
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10楼2012-06-25 18:05:46
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