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guo2010

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Caco-2使用优化,Caco-2变异性挺大的,希望能给大家一些帮助

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1楼 2012-06-17 10:43:05

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jonathonswq

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guo2010: 回帖置顶 2012-06-30 16:39:45

对细胞的代数要比较清楚。传代太多的可能会变异的比较厉害，建议找上海细胞生物所细胞库重新买。
由于细胞单层要将近一个月才能用，所以要注意细胞接种的无菌，一旦黄了就只能重来了。
细胞的传代和消化，由于caco-2细胞是贴壁细胞，不是很好消化，但如果EDTA和胰酶消化过度，细胞的再次贴壁就很难，到时就得不到很好的细胞单层了。
在接种的时候尽量将细胞吹打的比较分散，宁少勿多，以避免在transwell膜上形成很多细胞层叠的结构。
细胞成为单层后要考察窗口期，一般七天左右可用，时间长了就细胞状态就不适用于转运实验了。