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jemmy505210

银虫 (小有名气)

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[求助] 有没有用荧光探针测定细菌细胞ROS，求实验方法。。新手。谢谢已有4人参与

我想用H2DCFDA探针测定纳米材料对细菌细胞内ROS含量测定。。

是不是用荧光分光光度计

具体操作应该怎么做

谢谢

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学习再学习

1楼 2012-06-15 16:44:38

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

shunzhifulin

金虫 (小有名气)

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引用回帖:

12楼: Originally posted by hellolin at 2012-12-21 09:43:02
你好，不知道你现在做的结果怎么样了。我最近也在用荧光酶标仪测细胞的ROS。不知道你用的是哪种酶标板测的?是直接用的细胞培养的哪种透明板还是其他版？还有就是定量的问题，因为在洗细胞的时候会洗掉一部分细胞， ...

我用的是荧光分光光度计，对酶标仪的问题我也不了解。
你的第二个问题，试剂说明书上说DCF（产生荧光的物质）不透过细胞膜，我试验后发现，是不正确的。也就是说，你说的洗细胞的时候会洗掉一部分细胞，其实是洗掉了在上清中的DCF。这对结果的影响是很大的，我也没确定最终的定量方法。初步考虑不洗细胞，直接测。