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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 有没有用荧光探针测定细菌细胞ROS，求实验方法。。新手。谢谢
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jemmy505210

银虫 (小有名气)

[求助] 有没有用荧光探针测定细菌细胞ROS，求实验方法。。新手。谢谢 已有4人参与

我想用H2DCFDA探针测定纳米材料对细菌细胞内ROS含量测定。。

是不是用荧光分光光度计

具体操作应该怎么做

谢谢
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学习再学习
1楼 2012-06-15 16:44:38
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hellolin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by shunzhifulin at 2012-11-18 17:26:32
我现在也在测，仅用探针或是荧光分光光度计是不行的，要结合起来，探针只是发生反应，反应结果还需借助荧光分光光度计等仪器来检测，我只知道用荧光分光光度计的方法流式细胞仪不会用

你好，不知道你现在做的结果怎么样了。我最近也在用荧光酶标仪测细胞的ROS。不知道你用的是哪种酶标板测的?是直接用的细胞培养的哪种透明板还是其他版？还有就是定量的问题，因为在洗细胞的时候会洗掉一部分细胞，这对测定结果会产生一定影响，不知道你是怎么处理的。谢谢
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scienceguy
12楼2012-12-21 09:43:02
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没做过细菌的。不过一般在装载探针后，在荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察拍照，可以直观看到ROS迸发，通过对图像处理可以获得定量结果。
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2楼2012-06-15 17:53:23
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
H2DCFDA
Ex/Em: ~492–495/517–527 nm
密封干燥保存，现用现配，使用时溶于DMSO，工作浓度在1-10 微摩尔，一般1微摩尔就够，细胞处理时间大约30 min。
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3楼2012-06-15 18:00:51
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张俊亚

木虫 (正式写手)
好高深，没玩过！
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4楼2012-06-16 11:46:49
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