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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)


[交流] 放线菌遗传操作的硫链丝菌素抗性筛选问题?

最近在做放线菌接合转移,涉及硫链丝菌素抗性基因的使用及硫连丝菌素的压力筛选。初步试验感觉该选择标记不太好用,不容易挑选到接合子。大家在使用该选择标记时,遇到过问题吗?
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tanche163

捐助贵宾 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by pandajay at 2012-08-24 15:17:27
能问下硫链丝菌素溶液是怎么配的吗?
需要过滤除菌嘛?

dmso,我直接用,没有水的介质不会有菌

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2012-08-31 00:21:04
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
克隆大虾: 金币+2, 多谢交流...我做的小单孢属,25ug/ml,做了挺久,基本每次都不长.. 2012-06-16 01:17:50
硫连丝菌素确实容易出假阳性的~一般来说接合转移的时候孢子用多了容易出假阳性,孢子少一些的话就要好点~
2楼2012-06-15 08:01:01
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doriscc

金虫 (初入文坛)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
克隆大虾: 金币+2, 多谢交流...我做的小单孢属,25ug/ml,做了挺久,基本每次都不长.. 2012-06-16 01:18:17
你们的工作浓度时多少??我们使用50ug/ml,感觉还好~~
3楼2012-06-15 12:53:32
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syn1985

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
为什么这个抗性基因筛选的时候会出现假阳性啊?不懂 求问
4楼2012-06-16 10:25:08
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