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EbbE820金虫 (小有名气)
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[求助]
荧光仪测出的波长与液相上使用的波长不一致
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本人做某物质A的高效液相-荧光检测，参考文献中物质A的最大激发和发射波长分别是273和414 nm，我用高效液相荧光检测时如参考文献所设置，得到的色谱峰与紫外对比有明显增强。但是我用LS-55扫描的结果是最大激发和发射波长在331和395nm，在273 nm和414 nm几乎没有峰值；在液相上设置激发波长为314，发射波长为414 nm时，得到的峰明显比273的小。请问这是为什么呢？还望高人指点。 由于刚接触LS-55荧光仪，也不知道是不是自己操作有问题，因为我用的流动相是甲醇和水，所以样品是用甲醇配的，用LS-55测光谱操作如下 1.固定发射波长414，扫描纯甲醇的激发谱，当做空白 2.待测样品扣除1，得到激发光谱，激发峰值在331 nm 但是在激发峰后出现一个倒峰，对比空白发现是在发射波长414nm处（1 空白在414nm处有个很大的峰） 3.固定激发波长331 nm，扫描纯甲醇的发射谱，当做空白 4. 待测光谱扣除3，得到发射光谱，峰值在395nm |
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 紫外荧光 |
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