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luoziwei

新虫 (正式写手)

[求助] 求交流关节软骨各种切片的详细步骤

如题,刚取下关节软骨,正泡在PFA,想做冰冻切片和石蜡切片,但不知道需不需要先脱钙?有哪些地方需要注意的,好多文献里面都没说这么详细的。
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锵锵三人行

新虫 (初入文坛)

6楼2018-01-08 19:24:54
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查看全部 6 个回答

telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

没弄过软骨的,只弄过股骨的(小鼠),仅供参考!!!
对于骨的可以脱也可以不脱,我问过李凌衡他说脱得效果会更好,但要买一个universal block ,要不背景会高,非特异强 。 不脱钙的,刀不好买,要特殊的刀,可能会更好的还原最初形态。
脱钙的有快速慢速之分,你上网查一个,配点,脱脱就行

我的脱钙的实验方案
1)        小鼠股骨4% 多聚甲醛包被3天, 4℃
2)        4℃ 14% EDTA 脱钙, 3-5 天 (每隔 24 h 换一次14% EDTA)
3)        PBS洗 2 h
4)        浸入含30% 蔗糖的PBS溶液中,4℃ 过夜
5)        OCT 包埋
6)        用恒冷切片机切片,厚度约10µm(这个薄点也可以),并干燥(保持避光)  



至于软骨,你去病理啊什么地方试试,可能不用脱钙就能切的
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
2楼2012-06-11 17:31:44
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luoziwei

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by telomerase at 2012-06-11 17:31:44
没弄过软骨的,只弄过股骨的(小鼠),仅供参考!!!
对于骨的可以脱也可以不脱,我问过李凌衡他说脱得效果会更好,但要买一个universal block ,要不背景会高,非特异强 。 不脱钙的,刀不好买,要特殊的刀,可能 ...

真好,多谢答复。
3楼2012-06-11 17:57:20
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pancactus

新虫 (初入文坛)

求助:
我是新手,我问问大神软骨切片是怎么做的?有无详细步骤?做出来效果如何?多谢啦。
4楼2014-09-28 22:28:27
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