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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求交流关节软骨各种切片的详细步骤
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luoziwei

新虫 (正式写手)

[求助] 求交流关节软骨各种切片的详细步骤

如题，刚取下关节软骨，正泡在PFA，想做冰冻切片和石蜡切片，但不知道需不需要先脱钙？有哪些地方需要注意的，好多文献里面都没说这么详细的。
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1楼 2012-06-11 10:36:02
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
没弄过软骨的，只弄过股骨的（小鼠），仅供参考！！！
对于骨的可以脱也可以不脱，我问过李凌衡他说脱得效果会更好，但要买一个universal block ，要不背景会高，非特异强 。 不脱钙的，刀不好买，要特殊的刀，可能会更好的还原最初形态。
脱钙的有快速慢速之分，你上网查一个，配点，脱脱就行

我的脱钙的实验方案
1)        小鼠股骨4% 多聚甲醛包被3天， 4℃
2)        4℃ 14% EDTA 脱钙， 3-5 天 (每隔 24 h 换一次14% EDTA)
3)        PBS洗 2 h
4)        浸入含30% 蔗糖的PBS溶液中，4℃ 过夜
5)        OCT 包埋
6)        用恒冷切片机切片，厚度约10µm（这个薄点也可以），并干燥（保持避光）  



至于软骨，你去病理啊什么地方试试，可能不用脱钙就能切的
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
2楼2012-06-11 17:31:44
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luoziwei

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by telomerase at 2012-06-11 17:31:44
没弄过软骨的，只弄过股骨的（小鼠），仅供参考！！！
对于骨的可以脱也可以不脱，我问过李凌衡他说脱得效果会更好，但要买一个universal block ，要不背景会高，非特异强 。 不脱钙的，刀不好买，要特殊的刀，可能 ...

真好，多谢答复。
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3楼2012-06-11 17:57:20
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pancactus

新虫 (初入文坛)
求助：
我是新手，我问问大神软骨切片是怎么做的？有无详细步骤？做出来效果如何？多谢啦。
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4楼2014-09-28 22:28:27
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AliceVan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by telomerase at 2012-06-11 17:31:44
没弄过软骨的，只弄过股骨的（小鼠），仅供参考！！！
对于骨的可以脱也可以不脱，我问过李凌衡他说脱得效果会更好，但要买一个universal block ，要不背景会高，非特异强 。 不脱钙的，刀不好买，要特殊的刀，可能 ...

你好，我想请教下小鼠关节切片问题：
1）：取下小鼠腿之后要去皮吗？还是直接固定，切片时带皮切？
2）：CIA诱导的关节炎，是切股骨与胫骨之间的关节吗？还是胫骨与脚掌之间的关节？还是脚掌平切的各个小关节？
3）：关节是弯的，切片时如何包埋？
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5楼2016-03-08 16:38:58
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锵锵三人行

新虫 (初入文坛)
同求

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6楼2018-01-08 19:24:54
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