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果蔬汁中淀粉含量的快速测定方法是什么?
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可溶性糖及淀粉测定 一、试剂 1. 葡萄糖标准液:称取0.100g无水葡萄糖溶于蒸馏水中,定容至1000ml每毫升溶液含葡萄糖100μg 2. 硫酸-蒽酮试剂:称取0.2g蒽酮和1g硫脲(阻氧化剂)放入烧杯中,缓缓加入100ml浓硫酸,边加边搅拌。溶解后呈黄色透明溶液,贮于棕色瓶中,最好使用当天配制,贮于冰箱内约可使用两周。 3. 9.2N高氯酸:78.87ml HclO4稀释至100ml; 4. 4.6N高氯酸:35ml 9.2N HclO4稀释至70ml。 二、方法 1. 标准曲线的制作 加入蒽酮试剂时,最好将各管放在冷水中,并沿管壁缓缓加入,待全部加完后,再混匀。将以上标准管和样品管同时在100℃水浴中加热10min,取出自来水冷却,以空白作参比,在620nm波长下测其光密度,以光密度为纵坐标,以糖含量为横坐标,绘制标准曲线,并求出标准线性方程。 2. 可溶性糖的提取 称取1g样品,加5ml 80%乙醇,研磨成匀浆,80℃水浴中浸提10min,冷却,离心5min,重复浸提一次,离心5min合并以上离心后的上清液于25ml溶量瓶,用80%乙醇定容至刻度,沉淀备用测定淀粉。 3. 显色测定 吸取样品提取液0.1ml,加1.9ml蒸馏水,再沿管壁缓缓加5ml硫酸-蒽酮试剂,待全部加完后混匀,在100℃水浴中加热10min,在100℃水浴中加热10min,以不加样液管为对照,在620nm波长下测其光密度。 4. 计算 可溶性糖含量(%)={[查标准曲线(μg)×(样品液总体积/显色用样液体积)×稀释倍数]/样品(g)}×100 5. 还原糖含量测定:取0.5ml稀释液(1ml提取液稀释至10ml),加入1.5ml蒸馏水,1.5ml 3,5-二硝基水杨酸,混匀,沸水浴5min,冷水冷却,定容至25ml,用(53WB UV/VIS)分光光度计于520测定OD值。 6. 淀粉的提取 沉淀加水2ml,沸水浴糊化15min,冷却后加9.2N高氯酸2ml,不时搅拌15min后加水2ml离心,上清液倒入50ml溶量瓶中,沉淀加2ml4.6N高氯酸,不时搅拌15min后加水3ml离心10min,上清液倒入50ml溶量瓶中,沉淀再加4ml水,离心10min,合并上清液并用蒸馏水定容。 用测定可溶性糖的方法测定之。淀粉含量的计算也同上。 |
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