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TLC菜鸟

金虫 (正式写手)

[求助] 摸索三相流动相的方法

各位大侠,在下想知道,由两相的流动相甲醇、水,变为甲醇、水、乙腈,要怎么去摸方法呢?我做的是梯度洗脱。。。有什么原则性的办法么?两相的流动相我换了很多个梯度,结果还不理想,所以想试试能不能用三相,就是不知道从哪里入手,希望知道的大侠能帮我一下,感激不尽!!

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一只拖鞋827

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
leecius: 金币+1, 有时候加入甲醇会对选择性起到意想不到的作用。 2012-07-10 08:56:43
TLC菜鸟: 金币+2, ★★★很有帮助, 因为都做过这两个体系,就想试试看三相的效果怎么样,不知道要按照什么样的原则去做,能不能指导一下。 2012-07-10 21:01:49
流动相一般用甲醇和水或者乙腈和水,如果洗脱效果不好的情况,可以在水相中加入一些醋酸,或者磷酸缓冲盐。当然,如果后期进入质谱的话,最好别摸磷酸盐。如果你做的物质比较特殊,那就另当别论了。
顺其自然
6楼2012-07-10 08:52:45
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xbqewpq

荣誉版主 (著名写手)

魂兮

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
TLC菜鸟: 金币+2, 有帮助, 三相的主要作用是什么呢?在做LCMS的时候 2012-06-10 00:53:57
leecius: 金币+1, 谢谢。 2012-06-10 09:59:27
可以先分别用甲醇水或乙腈水单独摸下方法,然后根据情况(是出峰时间长,还是峰离太近)决定加甲醇还是乙腈。只作参考。
红颜远,相思苦,几番意,难相付。十年情思百年渡,不斩相思不忍顾!
2楼2012-06-08 22:19:49
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xbqewpq

荣誉版主 (著名写手)

魂兮

【答案】应助回帖


leecius: 金币+1, 谢谢。 2012-06-10 09:59:36
三相当然是为了样品中各峰能得到良好分离。同时出峰时间调整到不是很长。一针跑的几十分钟浪费时间不是。
红颜远,相思苦,几番意,难相付。十年情思百年渡,不斩相思不忍顾!
3楼2012-06-10 09:17:42
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-06-11 14:53:17
TLC菜鸟: 金币+2, 有帮助, 假如由两相变成三相,那要遵循什么原则呢?开始的时候怎么去变比例?我的是梯度洗脱 2012-06-11 23:57:52
如果乙腈--水或甲醇-水两相多次摸索都没有好的效果,估计三相也差不多。相同比例下,乙腈-水的洗脱能力相对较强,甲醇-水洗脱能力较弱,三相介于之间。所以,我认为,即使使用三相,效果未必能有效改善。
不知道你的物性如何,但不妨试试引用缓冲液,及调控流动相pH。
守候在风中的宁静。
4楼2012-06-11 13:05:59
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