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本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

蝈蝈1988

木虫 (小有名气)

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专业: 植物病理学

引用回帖:

10楼: Originally posted by yuzhiming at 2012-06-15 07:22:09
1. PCR上游：
UPstream-Forward：ataCTGCAGGACCGCAGCCTCATCAAAATTCG

2. PCR下游：
LOWstream-Reverse：ataGCATGCAGGTAATAAAAGGGGTCGGTCAA

PCR没有条带就要找找原因，未必是引物的问题。
用TAKARA公 ...

我用的extaq和hs 高保真酶。。。。。亲，能不能给些建议和意见呢？？？

心态决定命运

11楼2012-06-16 15:37:37

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yuzhiming

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【答案】应助回帖

★
小丹木木: 金币+1, 热心的虫虫 2012-06-18 13:34:49

可以用TAKARA的LA taq酶PCR看看
还有，你的模版是否是能够保证质量的？
这个也很关键。

12楼2012-06-17 19:09:30

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蝈蝈1988

木虫 (小有名气)

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引用回帖:

12楼: Originally posted by yuzhiming at 2012-06-17 19:09:30
可以用TAKARA的LA taq酶PCR看看
还有，你的模版是否是能够保证质量的？
这个也很关键。

革兰氏阴性细菌的基因组dna。ctab法提取的有少量断裂片段，跑胶鉴定的。恩，我用一下lataq，杂片段多怎么办啊？？？？跑出好多条带。

心态决定命运

13楼2012-06-17 21:51:51

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yuzhiming

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【答案】应助回帖

退火温度提高。
最好做一个PCR退火温度的梯度。

14楼2012-06-18 14:55:30

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yuzhiming

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【答案】应助回帖

重新设计了。你再试试！

15楼2012-06-19 13:05:58

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