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郑江松

银虫 (正式写手)

[交流] 微生物限度 已有6人参与

各位GGJJ,我最近在帮导师做点微生物限度方面的一个项目,刚开始在摸索菌的合适浓度,倍比稀释,发现有些稀释倍数高的平板比低的平板长的菌还要多呢,这个现象比较普遍?为何?  第二个就是我的菌就算稀释到10的11次方了还是超过300个? 我现在都不知道我哪地方可能出现问题了,由于是新手一枚,希望高手们予以指点,不甚感激~~~
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yhjcwangyw

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
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amisking: 金币+3, MicEPI+1, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-06-07 21:11:37
稀释倍数高的平板比低的平板长的菌还要多,这个从理论是都说不过去,怎么会普遍呢。肯定是在操作过程中出现了问题,首先每个梯度的稀释一定要摇匀,稀释的时候最好用生理盐水,从稀释到涂板的时间不要拖的太长,你做这种实验,最好用15-20cm的那种大号培养皿,每次吸取0.2ml样品进行涂布,不能吸取太多,而且一定要涂均匀(从中心向四周划圆圈进行涂布,)涂布时涂布棒火焰灭菌后一定要彻底冷却,以防烧死菌种。每个稀释度至少做三个平行。长出的平板上的菌落以五六十个为宜
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3楼2012-06-07 17:35:47
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yhjcwangyw

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
您这是细菌 酵母还是霉菌?
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2楼2012-06-07 17:27:31
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hqplar

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你是涂布还是倒平板呢?我感觉涂布不如倒平板准确。每个稀释浓度吸取1毫升倒板,而且稀释时,每稀释一步都要换一根管,吹打10次后,进行下一步稀释。
4楼2012-06-08 12:51:10
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foxcl

铁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
涂不好,就倒平板吧。省事儿。不过整体长出的菌落要小于涂布的。
5楼2012-06-10 14:49:16
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郑江松

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yhjcwangyw at 2012-06-07 17:27:31
您这是细菌 酵母还是霉菌?

你好,限度是细菌,酵母霉菌都要做的啦~~~
希望同道人多多交流。。。。
6楼2012-06-12 23:14:18
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郑江松

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hqplar at 2012-06-08 12:51:10
你是涂布还是倒平板呢?我感觉涂布不如倒平板准确。每个稀释浓度吸取1毫升倒板,而且稀释时,每稀释一步都要换一根管,吹打10次后,进行下一步稀释。

谢谢,我刚开始时倒平板的,但是倒出来后发现平板里面有很多小小的像菌样的东西,但不确定,和培养基上不太一样。 最近我又涂布试了下,感觉还是不太好~~求解?我稀释是每种菌用一根管子,您说每一步要一根,必须要这样吗?
希望同道人多多交流。。。。
7楼2012-06-12 23:17:16
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郑江松

银虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by foxcl at 2012-06-10 14:49:16
涂不好,就倒平板吧。省事儿。不过整体长出的菌落要小于涂布的。

对,我对比了下,比涂布的少了一半的样子,但是倒平板培养基下面长了小小点状菌不知是什么?
希望同道人多多交流。。。。
8楼2012-06-12 23:18:19
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郑江松

银虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yhjcwangyw at 2012-06-07 17:35:47
稀释倍数高的平板比低的平板长的菌还要多,这个从理论是都说不过去,怎么会普遍呢。肯定是在操作过程中出现了问题,首先每个梯度的稀释一定要摇匀,稀释的时候最好用生理盐水,从稀释到涂板的时间不要拖的太长,你做 ...

您的回复很有用,谢谢!的却每次涂布量不能太多,我今天用了1ml,结果悲剧了,另外我想咨询下,稀释时候要换管子吗?移液管~~~谢谢
希望同道人多多交流。。。。
9楼2012-06-12 23:20:51
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zier1011

木虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 郑江松 at 2012-06-12 23:18:19
对,我对比了下,比涂布的少了一半的样子,但是倒平板培养基下面长了小小点状菌不知是什么?...

厌氧菌,
花还香香的
10楼2012-06-13 09:18:29
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