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lilyxieyx

新虫 (小有名气)

[求助] 色谱峰忽然拖尾,求解决方案

新买不久的C18色谱柱,2.7um的填料粒径,4.6mm*50mm,之前进样峰型一直很好,有一次样品进样量比较大,进样后发现柱压增加到原来的2倍。之后再进的样品都拖尾很严重。柱子前端装有保护柱,而且最高的柱压远低于柱子安全使用说明所要求的压力上限。想知道后面应该怎么处理,需不需要更换新色谱柱。谢谢
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lilyxieyx

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 温炎 at 2012-06-10 22:04:59
这压力是很高,还是很明显出在柱子上,奇怪的是你的保护柱没事,反而是柱子有问题,那你进的是什么?柱子一般是累积性的的,一针两针不会出什么问题,除非你的样品处得太成问题。...

样品是硫酸铵沉淀的蛋白,加甲醇溶出结合在蛋白上的小分子化合物,13200rpm离心15分钟后上清液。之前同样的样品用4.5um颗粒的C18柱子没有什么问题,不清楚是不是这个柱子颗粒太小,这样处理样品容易堵。
10楼2012-06-10 23:49:38
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xbqewpq

荣誉版主 (著名写手)

魂兮

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lihongyan424: 金币+1, 感谢应助,辛苦。 2012-06-04 12:23:42
lilyxieyx: 金币+10, 有帮助 2012-06-10 04:58:43
可能是你进样量太大有关,柱子不用换,可以先用甲醇水把流动相洗掉,再用纯甲醇、异丙醇、纯甲醇,甲醇水,这一顺序冲柱子,各40毫升,最后换上流动相,看峰形是否有改善。
红颜远,相思苦,几番意,难相付。十年情思百年渡,不斩相思不忍顾!
2楼2012-06-04 11:16:44
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393432537

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
柱子应该是没有问题,有多余的柱子可以换下来先用新的柱子,这个可以多冲洗一下,我也出现过这种请况,同样的两根C18柱,一根就总是拖尾,一根就很好,
想象所有的80,90的年轻人不再哀叹现实的渺茫、生活的压力,真正通过不懈的努力和奋斗,达到即使不是大富大贵的平静生活,得到珍贵的人格所赋予自己和别人的幸福
3楼2012-06-04 12:20:39
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
样品残留问题,分别清洗一下进样针和管路试试吧。
守候在风中的宁静。
4楼2012-06-04 12:40:20
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