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xiacongmin金虫 (小有名气)
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F-7000 日立荧光分光光度计:关于时间扫描模式,荧光值不稳定的原因的问题
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我现在正在用日立的F-7000来检测伏马毒素,伏马毒素本身没有荧光,用OPA试剂衍生后再来测,但衍生后的化合物不稳定,荧光会随着时间衰减。 伏马毒素是溶于乙腈:水=1:1的溶液中的。所以我配制了一系列浓度的伏马毒素标准溶液,空白是乙腈水(因为空白与OPA试剂衍生后也有荧光,但低于系列浓度的伏马毒素衍生后的荧光值)。然后对分别空白和系列浓度的伏马毒素衍生后进行时间扫描。分别计算前30S的荧光平均值,再绘制标准曲线。 问题是每次的的标准曲线结果都比较好(相关系数能到0.99以上,),但是每天和每天测的荧光值有一定差别,就是曲线方程不一样。 这是因为是有系统误差呢?还是荧光受条件因素较多,所以每次的都不一样呢? 还有就是我应该怎样来调零和扣除空白呢? 时间扫描模式下有必要调零和扣除空白吗? |
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