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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR空白对照组阳性
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waldenpond

金虫 (著名写手)

[求助] PCR空白对照组阳性

最近做PCR，结果电泳后空白对照组（无DNA模板，加的是ddh20）总是阳性。操作应该没有问题啊。枪头随时换，ddh2o也是刚消过毒的，即使里面有DNA，电泳后的浓度也不应该这么大啊（空白组的条带和其他条带差不多亮）。
大虫们看一下是怎么回事啊。
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1楼 2012-05-31 10:36:38
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jasonwyb123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
waldenpond: 金币+1, ★有帮助 2012-06-03 15:58:49
以前我们也出现过一次这样的问题
最后发现啥水污染了
这个你既然尝试过
那你也必须验证下是不是装水的管子污染了
还有模板啊之类的都尽可能的用个新的吧
不能因为一点钱就浪费了自己宝贵的时间啊
赞一下 回复此楼
11楼2012-06-01 13:35:20
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caoluoyuan

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-31 13:46:44
waldenpond: 金币+5 2012-06-03 15:57:32
肯定是污染了，ddH2o2建议先用DNA酶处理一下再高压，还有可能是dNTP混合液污染了，建议换新的试试。祝你好运。
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2楼2012-05-31 11:48:07
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hongqifei

木虫 (小有名气)
PCR循环数多少呢？
赞一下 回复此楼
何须剑道争锋？千人指，万人封，可问江湖鼎峰，三尺秋水尘不染，天下无双。
3楼2012-05-31 15:10:16
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cxb-abc

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
waldenpond: 金币+3 2012-06-03 15:57:42
建议污染严重的PCR，在超净台上进行，再做PCR试一试？用可灭菌的枪头来操作。
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-31 15:54:33
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