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chupeina

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光发射光谱发生红移是怎么回事

在用荧光光谱同时检测微藻细胞中某种物质的时候(EX:520, EM:580),
这里,本身这种物质不能发光,需要先进行染色,
可是我这种细胞细胞壁较厚,染色效果不是太好,于是参照文献用微波促进细胞染色,再拿去测荧光发射光谱发现,
还是在原来的激发波长下(EX:520),荧光发射光谱的波长发生红移(EM:600),请问这是怎么回事啊??
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txq5346382

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chupeina: 金币+5, 有帮助 2012-07-15 20:10:51
微波会不会对你检测的物质结构产生影响
2楼2012-05-28 09:56:26
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chupeina

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by txq5346382 at 2012-05-28 09:56:26
微波会不会对你检测的物质结构产生影响

我是重复文献上的,却没有得到文献上结果。
3楼2012-05-28 09:59:38
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chupeina

新虫 (初入文坛)

这种方法的发光原理是,该荧光物质的发射波长会随着被测物质极性的增加而发生红移
4楼2012-05-28 10:01:54
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txq5346382

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你去网上查一下细胞促溶是不是单纯的破坏细胞壁结构
5楼2012-05-28 10:24:31
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txq5346382

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

极性,刚性平面都会对荧光有影响吧
6楼2012-05-28 10:26:15
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chupeina

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by txq5346382 at 2012-05-28 10:24:31
你去网上查一下细胞促溶是不是单纯的破坏细胞壁结构

微波法肯定会破坏细胞的结构,但是促溶并不一定要破坏细胞的结构
7楼2012-05-28 10:32:38
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chupeina

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by txq5346382 at 2012-05-28 10:26:15
极性,刚性平面都会对荧光有影响吧

我的疑问主要有两点:1 为啥重复不出文献的结果;2 我自己也想不出出现这种现象的原因
8楼2012-05-28 10:33:29
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huaibinzhang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有可能象上面说的原因一样,染色后荧光物质结够发生了变化及微波对细胞的影响,导致荧光光谱红移,另外也有可能是你的实验得到了新的结果,红移,意味着发射光的能量降低,也就是说电子在跃迁过程中能量损失过大或者S0到S1之间的能级发生了改变,你可以改变一下激发波长(波长增大试试)看看发生光谱的位置,如果还像你现在一样,那么你的实验也许比较成功,经过你的实验可以得出:在长波长处、红外、近红外光激发下就可以得到很好的荧光信号!
9楼2012-06-29 16:23:56
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