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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 内标定量问题
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TLC菜鸟

金虫 (正式写手)

[求助] 内标定量问题

各位大侠，我想问个问题，我做LCMS定量，用的是1ml的柱子，要柱后分流，但是分流比不准，同时我的样品里面是有个内标的，请问，这样定量会不会有影响呢
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只为活个问心无愧。。
1楼 2012-05-25 13:10:48
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小包子小笨猪

木虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 应助指数-1, 非应助 2012-05-26 16:47:14
额，还没用过这么高级的仪器。。。
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坚持到底
2楼2012-05-26 14:04:16
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瑞玲

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-05-26 16:47:20
分流比不准是一定会影响的 除非 你每个样品都是平行的 要不肯定出的量不准 浓度不同
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3楼2012-05-26 14:54:46
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pejawj

铜虫 (初入文坛)
加入IS的话相当于已经把化合物的浓度和IS浓度的比值确定下来了，可以有效解决比如转移过程带来的损失。
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4楼2012-05-28 09:39:58
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TTN-31

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-05-28 10:29:17
TLC菜鸟: 金币+3, 那我应该以那个内标的面积为准校正呢，还是说不用 2012-05-28 12:57:43
不会影响。
因为你的样品和内标是在一个均一的溶液里，那么每个样品分流多少进质谱，其实已经没有太大的影响，因为样品进的少了，内标进的量也少了同样的比例，最后用样品峰面积与内标峰面积的比与二者的浓度比回归或者往标准曲线中代，得到的浓度不会有影响。
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5楼2012-05-28 10:24:48
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TLC菜鸟

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by TTN-31 at 2012-05-28 10:24:48
不会影响。
因为你的样品和内标是在一个均一的溶液里，那么每个样品分流多少进质谱，其实已经没有太大的影响，因为样品进的少了，内标进的量也少了同样的比例，最后用样品峰面积与内标峰面积的比与二者的浓度比回归 ...

就算是我分流比不准也没关系吧？
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只为活个问心无愧。。
6楼2012-05-28 12:58:35
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TTN-31

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by TLC菜鸟 at 2012-05-28 12:58:35
就算是我分流比不准也没关系吧？...

嗯 。
你可以用标准品进一下试试，我认为没有影响，但要保证内标和你的样品混合均匀。
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7楼2012-05-28 13:41:12
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lonq1988

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
karl2100: 金币+1, 谢谢发言！ 2012-06-01 23:32:44
TLC菜鸟: 金币+5, ★有帮助, 大概是4：6的分流比，但是不能精确，要怎么控制不超出线性范围呢》 2012-06-24 10:19:45
分流不准是有多不准？在损失过大的情况下，会超出线性范围，内标就不准了，在小范围内偏差，靠内标是可以的
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请多指教
8楼2012-06-01 18:37:04
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一只拖鞋827

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果你的分流比是商品化的那种，一般不会影响定量的，如果是你自己改装的那种就会影响的。毕竟痕量分析的影响因素比较多！
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顺其自然
9楼2012-07-10 08:57:06
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白水6177

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
TLC菜鸟: 金币+3, ★★★很有帮助, 比如说？时间差是怎么产生的呢？ 2012-07-10 21:00:34
我是做药代的，我觉得内标和样品的性质差异多大是问题的关键，如果在色谱柱分离的时候两个物质差异大，应该在柱后分离时产生时间差，分流不准势必带来定量不准确，靠比值来定量也不行。
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10楼2012-07-10 16:02:24
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