应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 电泳图谱咋这个样子，求助啊！
汕头大学海洋科学接受调剂
51/1返回列表
查看: 1605  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

bio830805

银虫 (小有名气)

[交流] 电泳图谱咋这个样子，求助啊！

发觉自己的DNA电泳谱图老是很分得不好，有时候有很严重的拖尾现象。上次看到楼上实验室的师姐做得就非常清晰，每个band都分得很开，而且没有拖尾。我一般做电泳的条件是：
1.电压为80mV，
2.电泳时间一般为25－30min
3.一般吸取5ul待测DNA悬液，加到1ul loading buffer上混匀，然后加入well.
感觉条带总是不好，用的是Bio-rad的凝胶成像仪。
我最近做的一张图谱再附件里。

想请问各位前辈：
1.电泳电压对band的清晰度和分辨率影响有多大？
2.loading buffer的加量要遵守什么哪些条件，是不是有比例的？
3.怎么才能让电泳图看上去好些呢？
回复此楼

» 猜你喜欢
不会跳舞的外语达人不是好生物学家
1楼 2007-04-21 10:12:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Doublel

铁虫 (小有名气)
★
asr(金币+1):估计是打错了,呵呵
"电压为80mV"是不是有什么问题啊？应该是80V吧？
赞一下(5人) 回复此楼
7楼2007-04-21 18:49:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

asr

荣誉版主 (知名作家)
★
dfggc(金币+1):多谢交流
4.10-4.12
泳道
名称
1
Mark
2
Quantitive mark
3
DNA (diluted 12-fold)
4
DNA (diluted 11-fold)
5
Mark
6
PCR product 1
7
PCR product 2

PCR process:
94℃ for 4 min
94℃ for 1 min
52℃ for 45s
72℃ for 2 min
Go to 2 for 29 times
72℃ for 10 min
4℃ for ever

1                 7
赞一下(5人) 回复此楼
思想极度邪恶，勿怕勿怪！\(^o^)/~
2楼2007-04-21 11:12:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Doublel

铁虫 (小有名气)
★
dfggc(金币+1):多谢交流
电泳时电压过高会导致电流强度增加，而电流的热效应是和电流的平方成正比的，电流强度过高会直接导致凝胶发热。凝胶发热使DNA分子热运动加剧，扩散速度加快，从而导致条带不清晰。
赞一下(5人) 回复此楼
3楼2007-04-21 11:15:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lys6827

木虫 (著名写手)
★
dfggc(金币+1):多谢交流
如果你做PCR产物检测，建议取2ul的产物与2ul的loading buffer混合后点于1%胶以120伏电压电泳。如果是总DNA检测取1ul与2ulloading混合，胶用0.5%到1%以50伏电压电泳。回收胶则用2%，电压50-100伏，将3ul的loading 加到所用产物中混合后上样。
赞一下(5人) 回复此楼
4楼2007-04-21 11:55:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化工学硕294分，求导师收留 +27 yzyzx 2026-04-12 30/1500 2026-04-14 05:42 by 西北望—风沙
[考研] 一志愿085502，267分求调剂 +18 再忙也要吃饭啊 2026-04-08 19/950 2026-04-13 21:27 by wunaiy88
[考研] 考研二轮调剂 +10 故人?? 2026-04-09 10/500 2026-04-13 09:55 by szhize
[考研] 一志愿中国科学院上海有机所，有机化学356分找调剂 +12 Nadiums 2026-04-09 12/600 2026-04-13 08:50 by lhj2009
[考研] 22408调剂315分 +3 zhuangyan123 2026-04-09 3/150 2026-04-12 00:25 by 蓝云思雨
[考研] 0860004 求调剂 309分 +9 Yin DY 2026-04-08 9/450 2026-04-11 22:55 by dongdian1
[考研] 一志愿厦大0856，306求调剂 +15 Bblinging 2026-04-11 15/750 2026-04-11 22:53 by 314126402
[考研] 296求调剂 +8 汪！？！ 2026-04-09 8/400 2026-04-11 21:02 by 逆水乘风
[教师之家] 请问地理、遥感方面，可以做哪些横向项目啊，纵向完不成考核啊 +3 锦衣卫寒战 2026-04-07 5/250 2026-04-11 20:51 by 豫椒
[考研] 调剂 +6 青灯不负 2026-04-09 6/300 2026-04-11 20:35 by dongdian1
[考研] 343求调剂 +9 王国帅 2026-04-10 9/450 2026-04-11 20:31 by dongdian1
[考研] 284求调剂 +11 archer.. 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:23 by 蓝云思雨
[考研] 283求调剂 +22 那个噜子 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 10:41 by 逆水乘风
[考研] 309求调剂 +14 wdhw 2026-04-10 15/750 2026-04-10 21:06 by zhouxiaoyu
[考研] 求调剂 +5 不会飞的鱼@ 2026-04-10 5/250 2026-04-10 19:07 by chemisry
[考研] 一志愿京区985，085401，与本科专业一致，电子信息工程， +4 阳光开朗的男孩 2026-04-10 4/200 2026-04-10 18:27 by shenrf
[考研] 一志愿矿大，材料工程专硕314分，0856可调都可以 +15 无懈可击的巨人 2026-04-09 15/750 2026-04-10 18:10 by hmn_wj
[考研] 298求调剂 +13 钉叮咚冬瓜 2026-04-09 13/650 2026-04-10 15:49 by jiajinhpu
[考研] 278求调剂 +27 范婷娜 2026-04-07 31/1550 2026-04-09 20:49 by zhouxiaoyu
[考研] 334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 09:28 by wdyheheeh
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭