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wshi85

木虫 (正式写手)

[求助] 一个简单实验的设计

懦懦的问下:我想做一个酶的基因的测序,是不是可以先提取总的RNA,之后是否可以直接就将总的rna进行cDNA合成(需不需要进行mRNA进行提取?),在设计引物扩增mRNA的基因?本人还未涉足这些实验,但是马上要做了,所以请教大家
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很久没在虫虫上漂游了,觉得回归虫虫!
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yingyifei

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-05-23 13:58:26
wshi85: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-05-24 08:40:08
mRNA的量一般比较少,直接用通用引物反转录,rRNA会对实验产生较大的影响,我觉得应该提出mRNA然后再反转录成cDNA。不过,如果tRNA的量可以达到一定的量,直接设计引物反转录也可以,用引物PCR可以特异性的扩增出需要的产物,然后再进行接下来的实验
ying
3楼2012-05-22 23:51:58
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