| 查看: 1841 | 回复: 11 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
RNA电泳
|
|||
|
各位高手大家好，新手在此请教几个问题, 希望各位不吝赐教 请问我从细胞中提取出来的RNA经反转录用于后续PCR，要确定它的完整性，除了测OD值还要进行电泳表征吗？ 另外，测吸收时全部都要用DECP水吗？一定要用甲醛变性琼脂糖凝胶电泳吗，所有电泳时的溶液包括电泳缓冲夜、载样液等都要用DECP水吗，电泳槽要经特殊处理吗？ 我测RNAOD值时用普通二次水稀释后，测其OD值为1.875，是不是说明只测吸收不能说明RNA的完整性？ 先谢谢大家！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 基因工程、分子技术、微生物理论 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有113人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助，谢谢分享经验 2012-05-21 17:22:34
821078607: 金币+4, ★有帮助, 谢谢~~ 2012-05-21 22:23:42
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助，谢谢分享经验 2012-05-21 17:22:34
821078607: 金币+4, ★有帮助, 谢谢~~ 2012-05-21 22:23:42
|
呵呵，我也是个新手，特别是对于细胞核酸的提取来说。我提植物组织的核酸较多。在此说一下我的感受。 1.RNA提取出来要验证其完整性，一般是通过测OD和跑电泳结合来看，OD260/OD280在1.6-2.0都可以，跑胶的话跑个普通的琼脂糖凝胶就可以了，主要是28s和18s的亮度，5s一般不能太亮，否则大都是降解了 2.测OD时稀释和空白最好用你溶RNA的液体，这样测得的结果才比较准确。电泳时电泳缓冲液和载样液其实也不用DEPC,不过最好换新鲜的电泳液。电泳槽拿纯净水冲冲就可以。跑胶过程比较快，RNA在此过程中也没么快降解。 3.只测OD260不能说明其完整性，但可以计算其浓度。 以上是个人实验的感受和经验，如有不对的地方还请指教，希望对你有所帮助！ |
3楼2012-05-21 01:17:31
cheng_xiao
木虫 (小有名气)
- MolEPI: 2
- 应助: 59 (初中生)
- 金币: 3645.2
- 帖子: 273
- 在线: 62.7小时
- 虫号: 1553648
- 注册: 2011-12-27
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
2楼2012-05-20 17:16:20
xiaotianxin
新虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 141.1
- 红花: 1
- 帖子: 63
- 在线: 19.7小时
- 虫号: 1531047
- 注册: 2011-12-09
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
4楼2012-05-21 10:53:19
5楼2012-05-21 11:09:46
