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nfy158

银虫 (小有名气)

[求助] 紫外诱变方法

小硕一枚, 最近在做细菌紫外诱变,在确定致死曲线的时候,我用的是先稀释之后涂平板 ,然后在紫外,但我用20W 30CM  1min 2 min  3min照出来之后,培养长出来的菌落数都和没照之前差不多, 那位大侠知道这是个什么情况啊 。
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yxx220

金虫 (正式写手)

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★ ★
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nfy158: 金币+2, 有帮助, 谢谢,还是按照先紫外 在涂平板。 这样效果应该好些 2012-05-20 09:57:26
可以试下用磁旋搅拌器让菌液在紫外灯下搅拌5min那样,然后再涂平板。那样就可以保证菌液能充分被照射诱变了。希望对你有用。
5楼2012-05-20 09:46:26
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zxx123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


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nfy158: 金币+1 2012-05-19 16:16:20
你是涂平板后再照紫外吗,好像应该先照紫外,黑处理后再涂吧。另外可通过延长照紫外的时间来提高突变。
2楼2012-05-19 14:51:37
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nfy158

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zxx123 at 2012-05-19 14:51:37:
你是涂平板后再照紫外吗,好像应该先照紫外,黑处理后再涂吧。另外可通过延长照紫外的时间来提高突变。

嗯,我在论坛里看到有说那么做的  就先涂平板然后紫外。                      先紫外再稀释的话比较麻烦,特别是梯度稀释,每一个照射时间都要稀释,还有几个平行,  所以看到这个方法觉得简单,就试了一下。一会儿准备再试一下,延长时间看看。
3楼2012-05-19 16:14:43
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damaomao

禁虫 (正式写手)

★ ★
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nfy158: 金币+2, 有帮助 2012-05-20 09:55:34
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4楼2012-05-20 09:39:39
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l68266152

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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nfy158: 金币+2, 有帮助 2012-05-20 21:53:40
注意避光,不然会会有修复的效果。我们是用的先涂布再诱变,效果很好。
相信自己
6楼2012-05-20 10:33:43
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nfy158

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by l68266152 at 2012-05-20 10:33:43:
注意避光,不然会会有修复的效果。我们是用的先涂布再诱变,效果很好。

谢谢,终于看到也有这么做的了。
我做的先涂布效果不太好,  有人说涂布之后菌会渗入培养基里面,照的不均匀。 现在我有点不敢先涂布再照了。
7楼2012-05-20 21:53:25
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nfy158

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by l68266152 at 2012-05-20 10:33:43:
注意避光,不然会会有修复的效果。我们是用的先涂布再诱变,效果很好。

还想问一下你们照的时间是怎样的,  先涂布再照 是不是比直接照菌液时间需要长一些?
8楼2012-05-20 21:57:40
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l68266152

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


nfy158: 金币+1, 有帮助 2012-05-21 11:26:04
引用回帖:
8楼: Originally posted by nfy158 at 2012-05-20 21:57:40:
还想问一下你们照的时间是怎样的,  先涂布再照 是不是比直接照菌液时间需要长一些?

我们是用紫外交联仪做的,这个机器可以控制诱变的能量。么有做过直接照射菌液的实验,“菌会渗入培养基里面”我觉得不太会吧?不过要注意的是一定要取适量的菌涂布均匀,不能有重叠,涂布后等培养基表面干燥后再进行紫外照射。
相信自己
9楼2012-05-21 08:23:04
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nfy158

银虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by l68266152 at 2012-05-21 08:23:04:
我们是用紫外交联仪做的,这个机器可以控制诱变的能量。么有做过直接照射菌液的实验,“菌会渗入培养基里面”我觉得不太会吧?不过要注意的是一定要取适量的菌涂布均匀,不能有重叠,涂布后等培养基表面干燥后再进

奥 ,我知道了,谢谢
10楼2012-05-21 11:25:39
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