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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 紫外诱变的常用剂量？
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骑猪看日出

铜虫 (小有名气)

[求助] 紫外诱变的常用剂量？

如题！文献中报道，一般采用15w的紫外灯，这个15w相当于多大的光强度，或者说折换成光亮度、光强度的单位，大概是个什么数值？一般采用什么单位表示？求高手解答。。。。
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1楼2012-03-26 08:37:49
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+2, 鼓励交流 2012-03-26 14:54:52
amisking: 回帖置顶 2012-03-26 19:57:48
骑猪看日出: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢指教 2012-03-27 08:25:21
这个问题，最主要的是个时间问题，不用考虑太多参数，告诉你个简单的方法，首先确定你要诱变的菌体的剂量，做个计数，确定数量级，至少要达到6次方，多做几份保持数量级的一致，然后同时诱变，以单位时间为标准(十五分钟，半个小时，一小时等……)，定时拿出一份菌体，计数，最佳诱变时间是活菌体数减少到十分之一，不同菌株的诱变时间，因其突变率的不同而不同……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2012-03-26 10:31:32
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xzhiqiang

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★
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zhang8826857: 金币+3, 鼓励交流 2012-03-26 22:58:52
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骑猪看日出
7楼2012-03-26 22:06:59
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普通回帖

骑猪看日出

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jiyannangxj at 2012-03-26 10:31:32:
这个问题，最主要的是个时间问题，不用考虑太多参数，告诉你个简单的方法，首先确定你要诱变的菌体的剂量，做个计数，确定数量级，至少要达到6次方，多做几份保持数量级的一致，然后同时诱变，以单位时间为标准(十 ...

再问个问题，菌数才用什么方式确定，是涂板还是计数？之前没搞过微生物。。紫外诱变就是以时间为诱变剂还是需要额外添加别的物质定向诱导（我自己理解的）
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3楼2012-03-26 10:45:59
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wjf008

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-03-26 14:55:18
诱变剂量主要是看时间，不能太长时间，时间太长就变成臭氧灭菌不是紫外诱变了，所以诱变用的菌液的浓度要低，要均匀且液面浅，时间控制最长不要超过几分钟。致死率控制在90%左右，采用平板计数。
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4楼2012-03-26 11:33:19
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研

【答案】应助回帖

★
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-03-26 14:55:37
引用回帖:
3楼: Originally posted by 骑猪看日出 at 2012-03-26 10:45:59:
再问个问题，菌数才用什么方式确定，是涂板还是计数？之前没搞过微生物。。紫外诱变就是以时间为诱变剂还是需要额外添加别的物质定向诱导（我自己理解的）

诱变都是随机的，哪有定向突变这么好的事啊，所以突变菌株数要求大量。计数可以用显微镜螺镜测微尺计数，也可以用液体稀释倒平板法，前者需要的时间很短，后者至少三天。自己根据实验条件确定吧……

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5楼2012-03-26 14:37:20
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研

【答案】应助回帖

有个东西说错了，是目镜测微尺。呵呵，螺旋测微尺是物理上用的，呵呵，混淆了……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2012-03-26 14:42:18
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骑猪看日出

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by xzhiqiang at 2012-03-26 22:06:59:
一般的做法是固定紫外灯，固定距离，先摸索诱变时间，以致死率在85—90%之间为好，诱变时以灭菌平板装入少量待诱变菌液，加入一枚灭菌的大头针，放置在磁力搅拌器上以大头针搅拌，以使菌液均匀。计算致死率的时候 ...

多谢指教，搞畜牧的玩微生物有很多不懂之处，希望能多多交流！
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8楼2012-03-27 08:28:01
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骑猪看日出

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jiyannangxj at 2012-03-26 14:37:20:
诱变都是随机的，哪有定向突变这么好的事啊，所以突变菌株数要求大量。计数可以用显微镜螺镜测微尺计数，也可以用液体稀释倒平板法，前者需要的时间很短，后者至少三天。自己根据实验条件确定吧……

筛选工作必然会很麻烦吧，有很多不懂之处，希望能多多交流
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9楼2012-03-27 08:31:10
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研
引用回帖:
9楼: Originally posted by 骑猪看日出 at 2012-03-27 08:31:10:
筛选工作必然会很麻烦吧，有很多不懂之处，希望能多多交流

多多交流吧，记得给金币啊。。。。。。
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10楼2012-03-27 10:07:02
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